重组人骨保护素对聚乙烯颗粒刺激破骨细胞功能的影响

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1、中国修复重建外科杂志2008年8月第22卷第8期·979·重组人骨保护素对聚乙烯颗粒刺激破骨细胞功能的影响#张海龙黄朝梁陈世荣【摘 要】目的通过观察重组人骨保护素（recombinanthumanosteoprotegerin，rhOPG）对聚乙烯颗粒刺激破骨细胞功能的影响，探讨rhOPG防治人工关节无菌性松动的可行性。 方法取出生24h内新西兰白兔5只，体重80～100g，雌雄不限。分离培养四肢长骨破骨细胞，以1×105/mL密度均匀接种于大小为10mm×10mm玻片和8mm×8mm×50µm骨片的24孔板内。根据加入rhOPG及聚乙烯颗粒浓度和密度的不同，玻片培养板和骨片培养板再

2、分别分为1×109/mL聚乙烯颗粒培养组（聚乙烯组）、1×109/mL聚乙烯颗粒和100ng/mLrhOPG共培养组（聚乙烯/rhOPG组）及空白对照组。于培养1、3、5、7d取细胞玻片行HE、甲苯胺蓝染色，抗酒石酸酸性磷酸酶（trafrateresistantacidphosphatase，TRAP）染色计数阳性细胞数；皮质骨片行甲苯胺蓝染色并用扫描电镜观察骨片吸收陷窝形态。 结果 TRAP染色后破骨细胞呈玫瑰红色；培养后5、7d，聚乙烯组阳性染色的破骨细胞与对照组、聚乙烯/rhOPG组比较明显增多，差异均有统计学意义（P<0.05）；对照组与聚乙烯/rhOPG组比较，差异无统计学

3、意义（P>0.05）。骨片吸收陷窝甲苯胺蓝染色呈蓝紫色；培养5、7d后，聚乙烯组骨片上的吸收陷窝计数与对照组比较明显增多（P<0.05）；培养后1、3、5、7d，聚乙烯/rhOPG组骨片上的吸收陷窝计数与聚乙烯组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 rhOPG可抑制聚乙烯颗粒对破骨细胞的刺激作用，可用于防治人工关节置换术后的无菌性关节松动。【关键词】破骨细胞重组人骨保护素人工关节兔中图分类号：Q813 Q256  文献标志码：AEFFECTOFRECOMBINANTHUMANOSTEOPROTEGERINONOSTEOCLASTSSTIMULATEDBYPOLYETHYL

4、ENEPARTICLES/ZHANGHailong,HUANGChaoliang,CHENShirong.DepartmentofOrthopaedics,theSecondAffiliatedHospital,ChongqingUniversityofMedicalSciences,Chongqing,400010,P.R.China.Correspondingauthor:HUANGChaoliang,E-mail:ali88ali88@126.com【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofrecombinanthumanosteoprote

5、gerin(rhOPG)onosteoclastswhichwerestimulatedbypolyethyleneparticlesandtoinvestigatethefeasibilityofapplyingrhOPGfortheprostheticasepticlooseness.MethodsTheosteoclastswereisolatedfromthelongbonesof5NewZealandrabbitsbornwithin24hours,weighing80-100g,maleorfemale,andwereplatedintothe24-wellcoversl

6、ips(10mm×10mm)andboneslices(8mm ×58mm ×50µm)atthedensityof1×10/mL.BasedonthedifferentconcentrationanddensityofrhOPGandpolyethylene9particles,theplatesofcultureweredividedinto3groups:thegroupwithpolyethyleneparticlesof1×10/mL(polyethylene9group),thegroupco-culturedwithpolyethyleneparticlesof1×10

7、/mLandrhOPGof100ng/mL(polyethylene/rhOPGgroup)andthecontrolgroup.TheglasscoverslipsandbonesliceswereexposedtoHE,toluidineblueandtartrate-resistantacidphosphatase(TRAP)stainingat1,3,5and7days,andTRAPpositivemultinucleatedcellsandbo