mir-199a对子宫内膜细胞生物学行为调控机制的研究

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1、上海交通大学博士学位论文MiR-199a对子宫内膜细胞生物学行为调控机制的研究姓名院系：学号：学科专业：研究方向：学位级别：指导老师：戴岚医学院0107219152妇产科学子宫内膜异位症医学博士狄文教授资助基金项目：上海交通大学“211”工程三期重点学科建设项目(211-2008-7)上海交通大学医学院2013年3月ADissertationSubmittedtoShanghaiJiaoTongUniversityfortheDegreeofPhilosophyDoctorTheRolesofMiR-199aonBiologicalBehaviorsofEndo

2、metriaICellsIAuthor：LanDaiMajor：ObstetricsandGynecologySpecialty：EndometriosisAdvisor：Prof．WenDiFunding：ThisworkwassupportedbyLeadingAcademicDisciplinePrOgram，211ProjectforShanghaiJiaoTongUniversitySchoolofMedicine(thethirdphase；211-2008—7)．ShanghaiJiaoTongUniversitySchoolofMedicine，

3、Shanghai，People’SRepublicofChinaMarch，20132上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：五J；年4月t,f-．日3上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送

4、交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在_年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密囱。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名：日期：山13年4月，哆日4将刻磴轹尹L上海交通大学医学院2010级博士学位论文MiR-199a对子宫内膜细胞生物学行为调控机制的研究中文摘要子宫内膜异位症(内异症)是一种常见而棘手的妇科疾病，大约有10％．15％的育龄妇女患此病。由于目前尚缺乏对子宫内膜异位症发生发展的确切分子机制的了解

5、，严重阻碍了该疾病有效预防和治疗的发展。MiR-199a是较早发现的人类miRNA之一，具有调控细胞增殖、侵袭、转移等作用，其在多种肿瘤中异常表达并与肿瘤的发生发展密切相关。但其与子宫内膜异位症发生发展的关系及其对子宫内膜细胞生物学行为的影响研究甚少。本课题从研究miR-199a在正常子宫内膜、内异症患者在位内膜和异位内膜中的表达入手，利用脂质体转染技术提高子宫内膜间质细胞中miR-19跳的表达，并运用PCR、westemblot、CCK-8、划痕实验、体外移动和侵袭实验、微管形成实验，荧光报告基因实验等探讨miR-199a在子宫内膜间质细胞黏附、迁移、侵袭和促

6、血管形成过程中的作用。我们的实验结果提示：miR-199a在内异症患者在位内膜和异位内膜中的异常表达及其作用可能是影响子宫内膜间质细胞生物学行为的重要因素之一。本课题共分四个部分：QmiR-199a在子宫内膜异位症在位与异位内膜组织中的表达；②子宫内膜异位症患者子宫内膜细胞的分离及培养；③miR-199a对子宫内膜间质细胞黏附、迁移和侵袭能力的影响；(垄)miR-199a对子宫内膜间质细胞促血管形成能力的影响。第一部分miR-199a在子富内膜异位症在位与异位内膜组织中的表达目的：检测miR-199a在正常子宫内膜、内异症患者在位内膜、内异症患者异位内膜组织中的

7、表达，探讨miR-199a与内异症的关系。方法：利用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-199a在正常子上海交通大学医学院2010级博士学位论文富内膜、内异症患者在位内膜、内异症患者异位内膜组织中的表达，并比较它们之间的表达差异。结果：miR-199a在正常内膜组织中的表达水平显著高于内异症患者的在位内膜组织，两组比较，差异有统计学意义(P<0．01)；并且miR-199a在内异症患者在位内膜组织中的表达水平显著高于该患者的异位内膜组织，两组比较，差异有统计学意义(P<0．01)。结论：miR-199a的异常表达可能与内异症的发生有关。第二部分

8、子宫内膜异位症患者子宫内