microrna-30c及其靶基因mta-1在子宫内膜癌中的作用研究

《microrna-30c及其靶基因mta-1在子宫内膜癌中的作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、隶劫大·些硕士学位论文MircoRNA．30c及其靶基因MTA．1在子宫内膜癌中的作用研究IIMIlllllllllllILllIlllIlUllLlllllIY2511739TheeffectofMicroRNA--30canditstargetgeneMTA一1inthedevelopmentofenclometrlal■J●1●CarClnomaADissertationSubmittedtoSoutheastUniversityFortheAcademicDegreeofMasterofCl

2、inicalMedicineBYKongXiang-yiSupervisedbyProf．ZHOUHuai-junMedicalCollegeofSoutheastUniversityApril2013东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已

3、在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：≥上盘牲日期sb疆F—唑东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布(包括以电子信息形式刊登)论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布(包括以电子信息形式刊登)授权东南大学研究生院办理。～虢脚臌名他醐础中文摘要摘要MircoRNA-

4、30c及其靶基因MTA．1在子宫内膜癌中的作用研究目的子宫内膜癌发病率近年呈现上升趋势，严重影响女性生命健康。目前有研究显示microRNA(miRNA)表达的失调与子宫内膜癌的发生发展密切相关。我们的前期研究已经证实microRNA．30c(miR．30c)在子宫内膜癌中以肿瘤转移相关基因．1(MTA．1)为靶基因，参与子宫内膜癌细胞株增殖及侵袭能力的调节。本研究旨在深入探究子宫内膜癌中miR．30c的抑癌作用及其与靶基因MTA．1间的关系，并进一步探讨雌激素对两者表达的调控作用，为miR．30c

5、成为提示子宫内膜癌预后相关分子标志物及治疗靶点奠定基础。方法收集南京鼓楼医院子宫内膜癌手术病人的肿瘤组织(21例)及因非恶性因素行子宫切除术患者的正常内膜组织(14例)，Realtime．PCR技术测定miR．30c在不同内膜组织中以及不同子宫内膜癌细胞株中的表达情况。体外培养子宫内膜癌Ishikawa细胞株利用LipfectamineTM2000分别介导miR．30c的mimics(miR．mi)、inhibitor(miR．in)及MTA．1siRNA(si．MTA．1)转染入Ishikawa细

6、胞，并分别以各自的以无义随机序列scramble作为阴性对照，Realtime．PCR技术检测miR．30c及MTA．1表达水平的变化；Westernblot技术检测MTA．1蛋白质表达的变化；并应用MTT比色法检测细胞增殖能力，人工重组基底膜侵袭小室(Transwell)检测细胞侵袭能力。雌激素作用于Ishikawa及HEC．1．B细胞后Realtime．PCR技术检测miR．30c及MTA．1表达水平的变化。结果1、miR．30c在肿瘤组织中低表达于正常内膜组织，在ER阳性的Ishikawa细胞

7、中低表达于ER阴性的HEC．1．B细胞，而MTA．1在不同细胞株中的表达与miR．30c负相关。2、上调及下调miR．30c表达，分别降低及增加了MTA．1蛋白的表达，并且MTA．1表达的降低可以负反馈调节miR．30c，使得其表达上调。3、上调miR．30c可以抑制子宫内膜癌细胞株的增殖、迁移及侵袭能力，并通过共中文摘要转染实验证实miR．30c通过直接作用于MTA．1起调控作用。4、雌激素通过不同的方式作用于Ishikawa及HEC．1．B细胞株分别下调miR．30c表达及上调MTA．1的表达。

8、结论本研究证实miR．30c在子宫内膜癌组织中低表达，并且通过直接调控MTA．1表达而起到抑癌作用。另外，雌激素是miR．30c及MTA．1表达的一个重要调节因子。这些结论均提示miR．30c是调节子宫内膜癌发生发展中的一个重要miRNA，并且有望成为新的治疗靶点。关键词子宫内膜癌；Ishikawa细胞株；HEC．1．B细胞株；miR．30c；MTA．1；雌激素英文摘要AbstractStudyforthefunctionofMiR-30canditstargetin