cd147与mmp-2在葡萄胎组织中的表达以及意义

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1、～虢始臌章期二篓蒜j河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注等内容外，文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。，研究生签名：怒焉拐V导师签章：川年厂月7日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文CDl47、MMP．2在葡萄胎组织中的表达以及意义前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8日¨舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24综述CDl47、MMP．2在妇科肿瘤中的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35中文摘要CDl47与MMP．2在葡萄胎组织中的表达以及意义摘要目的：葡萄胎是妊娠滋养细胞疾病中最常见的一种疾病，分为完全性葡萄胎和部分性葡萄胎。葡萄胎为良性病变，但具有一定的恶变倾向，约有20％的葡萄胎会发展成为滋养细胞肿瘤，其中有6％．32％的完全性葡萄胎(completehydatidiformmole，CHM)和5％的部分性葡萄(partialhydatidiformmole，PHM)会发展为滋养细胞肿瘤【l】。大部分葡萄胎患者经过清宫可以治愈，但葡萄胎具有生

4、长活跃及潜在恶性的特点，完全性葡萄胎恶变率约20％，目前确定葡萄胎患者预后主要是通过清宫后随访，观察患者血D-HCG的变化及临床特征，至少需要8周时间才能发现恶变，但部分患者因对葡萄胎认识不够全面或者由于各地区医疗条件不完善不能定期随访，这些患者经常在出现临床症状时才就诊，以致延误就诊，使之恶变甚至发展为晚期而危急生命。由于尚无预测葡萄胎恶变及愈后的可靠指标，因此寻找预测葡萄胎恶变的相关指标具有十分重要的临床意义。本研究通过测定CDl47和MMP．2在葡萄胎组织中的表达，以探讨二者在葡萄胎发生发展以及侵袭转移中作用，及二者间的相互联系，以确定其是否能

5、成为预测葡萄胎恶变的重要指标。方法：标本的采集和处理：收集2005年11月至2012年7月年于河北医科大学第三医院就诊并行清宫术后病理诊断为葡萄胎患者的首次清宫组织30例；并收集正常早孕(6—8周)无其它疾病，要求终止妊娠的绒毛组织20例。所收集组织用4％的中性甲醛浸泡，清水冲洗，100％，90％，75％的梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋。连续石蜡切片，厚度为0．5um。分组：将组织分为正常绒毛组(20例)、葡萄胎组(24例)、侵葡组(3例)研究lVlMP．2、CDl47在各组的表达及意义；再将葡萄胎高危组(23例)分为恶变组(3例)、未恶变组(2

6、0例)进一步研究MMP．2、CDl47在有高危因素的葡萄胎患者的表达情况及与葡萄胎组织恶变的关中文摘要系。试验方法：石蜡切片脱蜡，二甲苯4分钟×2遍，95％酒精1分钟×1遍，75％酒精1分钟×1遍。清水冲洗3遍，放入95。C以上的修复液中进行热水浴修复10分钟(葡萄胎组织修复10分钟，绒毛组织修复8分钟)。放置室温待修复液温度降为37。C以下，清水冲洗3次。放入3％H202溶液37。C敷育20分钟。蒸馏水冲洗后，PBS浸泡5分钟。滴加鼠抗人MMP．2、CDl47单克隆抗体一抗MMP．2浓度为为1：200，CDl47为1：200，4。C过夜。清水清洗3

7、遍，滴加鼠抗羊二抗37℃温育40min；清水冲洗3遍，滴加新鲜配置DAB试剂，在光学显微镜下观察染色，适时终止染色。苏木精复染，分化反蓝，脱水、透明。中性树脂封片，在光镜下行结果判断。检测方法：每个切片随机挑选5个视野，用HMIAS．2000图像处理系统统计灰度值，取平均灰度值作为切片结果，灰度值越低说明蛋白表达越多。统计学分析：采用SPSS13．0软件进行数据分析，对CDl47、MMP．2在侵蚀性葡萄胎、葡萄胎以及正常绒毛表达强度的比较采用两个独立样本的t检验，尸<0．05说明差异有统计学意义。MMP．2、CDl47之间的相关性采用pearson积

8、差相关，P<0．05说明差异有统计学意义。结果：1正常绒毛的镜下形态：绒毛中的合体滋养层细胞与细胞滋养层细胞