鹅绒藤单体化合物体外抗肿瘤活性的实验研究

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1、分类号：R3单位代码：10752密级：公开学号：2010010宁夏医科大学硕士研究生学位论文鹅绒藤单体化合物体外抗肿瘤活性的实验研究TheResearchonAntitumorActivityofMonomerCompoundsFromCynanchumChinenseinVitro学位申请人：李洋指导教师：王琦教授合作指导教师：王妍教授申请学位门类级别：医学专业名称：病原生物学研究方向：中草药免疫所在学院：基础医学院论文完成日期：二○一三年四月宁夏医科大学研究生院NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicatio

2、nofMaster’sDegreeTheResearchonAntitumorActivityoftheMonomerCompoundsFromCynanchumChinenseinVitroStudent’sName:LiYangSupervisor：WangQiProfessorAssistantsupervisor:WangYanProfessorSubjectCategory:MedicalscienceMajor:PathogenbiologySpecialty:ChineseherbalimmuneSchool:CollegeofBasi

3、cMdicalScienceCompletionDate:Apr.2013宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定

4、向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要鹅绒藤单体化合物体外抗肿瘤活性的实验研究摘要目的：研究从鹅绒藤提取分离得到的三种单体化合物对体外培养的肿瘤细胞株增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法：用CellCountingKit-8法(CCK-8)观察，以正

5、常人胃粘膜上皮细胞GES-1作为正常对照，用不同浓度的鹅绒藤提取分离得到的正三十八烷(MonomerCompounds-Ⅱ，MC-Ⅱ)，山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(MonomerCompounds-Ⅴ，MC-Ⅴ)，7-O-α-L-鼠李吡喃糖基-山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(MonomerCompounds-Ⅵ，MC-Ⅵ)等单体化和物分别作用于人宫颈癌细胞Hela、小鼠淋巴瘤细胞YAC-1和人胃癌细胞MGC-803等细胞株24、48、72、96h后，观察对这三种肿瘤细胞增殖活性的影响，并选取对三种单体化合物敏感的细胞株，采用Hoechst33

6、342/PI双染荧光染色方法，观察不同浓度单体化合物作用下细胞凋亡的形态变化。结果：①MC-Ⅱ作用Hela细胞48和72h时，各剂量组的OD值有差异，在24、48、72h时对YAC-1细胞增殖有促进作用，在96h时有抑制作用(P<0.05)；MC-Ⅴ和MC-Ⅵ在50、100和200μg·mL-1浓度下处理Hela和YAC-1细胞48、72和96h后，其OD值均低于对照组(P<0.05)，且浓度越高OD值越低。MC-Ⅴ在各浓度下处理MGC-803细胞24、48、72和96h后，其OD值均明显低于对照组(p<0.05)，MC-Ⅵ各浓度仅在24h对MGC-

7、803细胞有抑制作用（P<0.05）。②MC-Ⅴ在作用Hela、YAC-1和MGC-803等细胞48h后，Hoechst33342/PI染色，荧光显微镜下，可观察到肿瘤细胞在加入不同浓度的单体化合物后，细胞开始萎缩，核开始固缩，随着浓度的提高，染色质凝集成团块状，显示出不断增强的亮蓝色和红光，其中以胃癌MGC-803表现最为明显；72h后的肿瘤细胞核固缩进一步加强，形成明显的圆珠子状结构，细胞边集化严重，呈现I宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要不均一的荧光显色结构。③MC-Ⅵ在作用YAC-1细胞48h后，各实验浓度组显示出不断增强的强蓝光和红光，

8、跟单体化合物浓度成正相关，细胞核多凝聚，固缩的染色质发出极强的亮蓝光；72h后，随着单体药物诱导时间的延长，