民族药材白花丹体外抗肿瘤活性研究

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1、民族药材白花丹体外抗肿瘤活性研究作者：颜晓燕　盛艳梅　辛志伟'【摘要】　　目的探讨白花丹体外抗肿瘤作用的活性部位。方法MTT染色法对白花丹五种溶剂提取物体外抗肿瘤活性进行了初步的研究。结果氯仿提取物对乳腺癌细胞（Bre-04）、神经癌细胞（N-04）、肺癌细胞（Lu-04）有较好的抑制生长作用，IC50分别为0.2699mg/ml、0.2634mg/ml、0.4961mg/ml，对肝癌细胞HepG2抑制作用差，IC50为0.9379mg/ml；白花丹石油醚提取部位对乳腺癌细胞（Bre-04）、神经癌细胞（N-

2、04）、肺癌细胞（Lu-04）、肝癌细胞HepG2的IC50分别为0.5902mg/ml、0.5725mg/ml、0.7938mg/ml、0.6374mg/ml；乙酸乙酯提取物对肺癌细胞（Lu-04）有一定的抑制作用，IC50为0.7343mg/ml；水溶性提取物以及正丁醇提取物无明显抑制肿瘤作用。结论白花丹氯仿提取部位、石油醚提取部位体外抗肿瘤作用较好，值得对其提取部位进一步分离纯化并研究其抗肿瘤作用机制。【关键词】民族药材；白花丹；抗肿瘤Abstract：ObjectiveToobservetheanti

3、tumoractivitiesofdifferentsolutionextractsofPlumbagozeylanicaL.invitro.MethodMTTmethodextractshadsignificantinhibitoryeffectsonthebreastcancercell(Bre-04),thenervecancercell(N-04)andthelungcancercell(Lu-04),IC50g/mland0.2634mg/ml,0.4961mg/mlrespectively.IC5

4、0ofchloroformextractontheHepG2g/ml.IC50ofpetroleumetherextractsonBre-04,N-04,Lu-04andHepG2g/ml,0.5725mg/ml,0.7938mg/ml,0.6374mg/ml；ethylacetateextractshadfairlyinhibitoryeffectsontheLu-04,IC50g/ml；n-butanolextractsandbagozeylanicaL.andpetroleumetherextracts

5、.Keyedicine;PlumbagozeylanicaL.;antitumor白花丹PlumbagozeylanicaL.为蓝雪科蓝雪属植物，又名白雪花、白皂药、山波苓、一见消、乌面马、火灵丹、假茉莉、猛老虎、白花岩陀等。主要分布在东南亚地区和我国四川、福建、台湾、广东、广西省等地区，为东南亚许多国家及我国多民族医用药材［1～3］。在民间有广泛的应用基础，药理作用广泛，其抗肿瘤作用有很大的研究开发价值。本实验对白花丹不同溶剂的提取部位进行了体外抗肿瘤活性筛选，以期能为进一步的开发利用提供实验依据。1材料和

6、方法1.1材料1.1.1供试品白花丹石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物以及水溶性提取物均由西南民族大学少数民族药物研究所提供。1.1.2癌细胞株乳腺癌细胞株（Bre-04）、神经癌细胞株（N-04）、肺癌细胞株（Lu-04）、肝癌细胞株（HepG2）由成都地奥制药有限公司惠赠。1.1.3主要试剂及培养用液等RPMI-1640培养基、DMEM（低糖）培养基（GIBCOBRL）；小牛血清（成都哈里）；胰蛋白酶（GIBCO）；MTT染料、DMSO（sigma）。1.1.4主要仪器CO2培养箱（T

7、hermo3111美国）；荧光相差显微镜（LX-71日本）；板式酶标仪（ZS-2北京新风机电技术公司）1.2方法［4，5］乳腺癌细胞（Bre-04）、神经癌细胞（N-04）、肺癌细胞（Lu-04）均用含10%小牛血清的RPMI-1640培养基培养，肝癌细胞（HepG2）用含10%小牛血清的DMEM（低糖）培养基培养，两种培养基均含青霉素和链霉素，浓度为100IU/ml。细胞均置于37℃，5%CO2的培养箱中培养，取对数生长期的细胞用于实验。贴壁细胞用0.25%胰酶消化，悬浮于含10%小牛血清培养基中，用滴管轻

8、轻吹打成细胞悬液，用培养基将悬液稀释至约50000个/ml的浓度。按每孔100μl接种于96孔板中，置于37℃，5%CO2的培养箱中预培养24h。次日加药，将待测物配成5个2倍稀释的浓度，96孔板每孔加80μl培养基，20μl药液，每个浓度3个复孔。正常对照细胞组加100μl培养基，溶媒对照组加80μl培养基，20μl溶媒，加药后，继续置于37℃，5%CO2的培养箱中培养。24～48h后，96孔板每