广西藤茶提取物ttf体外抗肿瘤作用的实验研究

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1、广西藤茶提取物TTF体外抗肿瘤作用的实验研究【摘要】目的观察广西藤茶提取物(简称TTF)体外抗肿瘤作用。方法采用MTT法，观察TTF及含药血清对肉瘤细胞(S180)、肝癌细胞(H22)、白血病细胞株(L1210)的细胞毒性及对细胞增殖的抑制作用。结果TTF及其含药血清在体外对S180细胞、H22细胞和L1210细胞均有明显的抑制作用。结论TTF体外具有抑制S180、H22、L1210肿瘤细胞增殖，且对S180细胞株的作用明显优于对H22、L1210的作用。【关键词】TTF；S180、H22、L1210肿瘤细胞株；体外抗肿瘤作用【Abstract】ObjectiveTostudy

2、theanticanceractivitiesofTTFinvitro.MethodsTheanticancereffectoftheTTFinvitrowasstudiedbyMTTassay，studiedthetoxicityandinhibitioneffectoftheTTFtotheproliferationofS180cells，H22cellsandL1210cells.ResultsS180-cells，H22-cellsandL1210-cellswereobviouslyinhibitedbytheTTFinvitro.ConclusionTTFhadth

3、eanticancereffectonS180-cells，H22-cellsandL1210-cellsinvitro.【Keywords】TTF；S180、H22、L1210cells；anticancereffect8invitro藤茶Ampelopisgrossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄的嫩茎叶［１］。主要分布于广西、云南、广东、贵州、湖南、湖北、江西、福建等省，为瑶族民间常用的草药之一。该药相传是瑶族王——盘王遗传下来的，至今已有数百年的应用历史。其性凉，味甘、淡，具有清热解毒、消肿止痛、祛风湿、强筋骨等功效，

4、主治黄疸型肝炎、感冒风热、咽喉肿痛、急性结膜炎等［２］。藤茶主要含黄酮类化合物，含量约45.52%［3］，其中的主要活性成分为双氢杨梅树皮素、杨梅树皮素，以双氢杨梅树皮素含量最多。现代药理研究表明藤茶总黄酮具有抗炎、保肝、降酶，抗血栓、降血糖等作用［4］，双氢杨梅树皮素对体外白血病细胞HL-60、K562、肝癌细胞Bel-7402、人鼻咽癌HK-1细胞、人乳腺癌MCF-7细胞的增殖及体内小鼠移植性B16黑色素瘤的生长均有显著的抑制作用［5，6］。以上资料提示藤茶具有良好的抗肿瘤作用，故我们对广西藤茶提取物TTF的抗肿瘤作用进行研究，现报告如下。1材料1.1细胞肉瘤S180细胞：

5、广西中医药研究所惠赠；肝癌H22细胞：广西民族医院惠赠；白血病细胞株L1210：广西中医学院新药开发中心惠赠。以上瘤株于动物身上以腹水形式传代保种。81.2动物昆明种小白鼠(广西中医学院实验动物中心提供，合格证号：桂医动字第11004号)。1.3药物TTF：由本院中药化学教研室提供，为一淡黄色粉末，纯度达85%；环磷酰胺：上海华联制药有限公司，批号：040914。1.4试剂RPMI1640培养基：GIBCO公司产品，批号1243098；新生牛血清(NBS)：杭州四季青公司，批号040228；MTT：北京拜尔迪生物公司分装，Amressco0793；二甲基亚砜(DMSO)：生工生

6、物工程(上海)有限公司，批号54186；注射用生理盐水：四川奇力制药有限公司，批号041018。1.5器材二氧化碳培养箱(美国Forma公司)；倒置相差显微镜(德国Leica公司)；酶标仪(奥地利Sunrise公司)；吉尔森微量移液器(法国Pipetman公司)；十万分之一电子天平(德国赛多利斯)；手提式消毒器(上海国营红卫医疗器械厂)。2方法［7］与结果2.1S180细胞、H22细胞、L1210细胞体外培养8分别取接种后第8天的瘤源动物，颈椎脱臼处死，用75%酒精浸泡，于超净工作台中用一次性注射器抽取1ml腹水置于4ml不含血清的RPMI1640溶液中，滴管冲吸均匀，离心(1

7、000rpm，10min)，重复2次，最后将细胞重悬于4ml含10%新生牛血清的RPMI1640培养液中，制成细胞悬液。取5μl稀释20倍后加0.4%台盼蓝染色，计数活细胞，活细胞达95%以上。用含10%新生牛血清的RPMI1640培养液将S180细胞悬液稀释为5×１０４个/ml，H22细胞、L1210细胞悬液稀释为1×105个/ml后接种于96孔培养板，100μl/孔，平行设空白对照孔(只加培养液，不加细胞)。接种后置于37℃，5%CO２的二氧化碳培养箱中预培养24h，然后进行以下体外实验