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1、《中国食品添加剂》仪对一俘甘露聚糖酶的制备及其应用研究进展齐军茄廖劲松彭志英华南理工大学食品与生物工程学院,广州摘要本文概述了一甘露聚糖酶作用底物的方式,不同生物来源的日一甘露聚糖酶的一般特性及其分离纯化技术,一甘露聚糖酶在、、。工业饲料添加剂食品方面的广泛应用,,一关健词甘露聚糖酶分离纯化应用一切,,劝豁笔饮一眼飞,郎场一,坛哪’力,以妇月翅欢妇份山一,,彻,,】一甘露,一。牙聚糖酶印一研究技术等多方面得到了广泛运用州,,又简称为卜甘露聚糖酶印一,是一类能够水解含有汁一甘露聚糖酶的作用方式及结构分析归一,卜甘露糖昔键的甘露寡糖、甘露多糖的内不同来源的甘露聚糖酶水解底物的方式
2、‘,。切水解酶〕它属于半纤维素酶类甘露聚糖是和深度主要与一半乳糖残基和葡萄糖残基在主,、、,以一份一毗喃甘露糖昔键连结的线状多链中的位置含量醋酞化的程度有关并且底物本,,。,糖如果主链某些残基被葡萄糖取代或半乳糖通身的物理状态也会影响酶对底物的作用例如结,,。,一一晶状态的甘露聚糖则不易被降解另外不同来源过糖昔键与甘露糖残基相连形成分枝则称之为异甘露聚糖,主要有半乳甘露聚糖的汗一甘露聚糖酶对底物的要求也不一样如瓜儿、、一,葡萄甘露聚糖半乳葡胶种子产生的牙甘露聚糖酶要求。。萄甘露聚糖列上述物质构成个连续的甘露糖残基甘露聚糖经份甘露聚糖,,,了植物半纤维素的第二大组份这些物质的降
3、解主酶作用后通过护或纸层析方法分析主要产。一,要依靠的酶就是一甘露聚糖酶酶解植物甘露物是寡聚糖一般个残基产物聚合度的大。,,聚糖的最早报道在本世纪初,但用微生物合成汗一小与酶和底物的来源有关,〕但是相对来说。。甘露聚糖酶则在近一二十年开始研究产生单糖甘露糖很少或根本不产生、、、,、、吴襟等分别用旧一卜甘露聚糖酶来源广泛在动物植物微生’。一一物中都发现有该酶的存在随着近来对自然界半等对诺卡氏菌形放线菌归甘露聚糖酶进行化,,、纤维素资源的开发和甘露寡糖药用价值的发现学修饰证明蛋白上的琉基酪氨酸残基及色氨酸日一甘露聚糖酶的研究和开发进人一个新高潮,它残基是维持酶活性的必需基团在蛋白
4、的各种二级、、、、,。一、一、一、已在食品医药造纸纺织印染石油开采及生物结构中螺旋折叠日转角自由卷曲的比©1994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net《中国食品添加剂》仪、、。,,例分别为和琉基露聚糖酶得到了凝胶电泳均一的酶制品为将来是酶蛋白中重要的活性基团和结构基团,在维持蛋俘一甘露聚糖酶的工业化生产积累了有价值的资,。料〔‘〕得出聚乙二醇沉淀法的纯化效果最好丙酮白构象稳定方面有重要作用该酶蛋白中二硫键〔“〕,,,的形成能明显增强酶的热
5、稳定性但在常温下沉淀法能得到较高的酶比活力和收率且操作简,,丙酮易于,。其它分子间作用力便足以维持该酶结构的稳定其便耗时短回收成本低。一中疏水性相互作用力和氢键发挥着重要作用色用嗜碱菌产生的碱性日甘露聚糖酶来进行,,,。氨酸残基在酶反应中也起到了重要作用因为极微生产与中性酶相比有着不易被杂菌污染的优势量的的存在能使酶活性迅速丧失,这说明,它杨清香等对嗜碱芽抱杆菌产生的碱性一,一可能是参与日甘露聚糖水解反应的重要活性基甘露聚糖酶进行了分离纯化并研究了其主要的酶团与正常色氨酸处的荧光发射光谱峰相学性质。报道了嗜碱芽抱杆菌,产生的碱比,日一甘露聚糖酶出现了明显的发射谱峰蓝移现性一甘
6、露聚糖酶经纯化后,在电泳上呈现,,象这表明该蛋白是一个典型的类蛋白〔〕且酶一条蛋白带,分子量为,等电点为一中的部分色氨酸残基可能位于蛋白分子内部的疏,酶反应最适为一,最适作用温度,由于底物,,一,水区域加人底物后和酶作用酶的发射为℃稳定为稳定温度为℃以,。,光谱峰有轻微蓝移并且峰强度有所增大该现象与下经薄层层析鉴定该酶水解槐豆胶后产生葡萄、”,、。文献报道的溶菌酶纤维素酶〔〕一致这表明在糖甘露糖以及低聚糖饰〕一这些糖昔水解酶中可能有着类似的色氨酸活性位在大多数的研究者集中在碱性甘露聚糖,。酶时崔福绵等’〕分离到特殊的枯草芽抱杆菌菌点株,该菌所产中性一甘露聚糖酶水解甘露聚糖的一
7、活力较高,特别是。俘甘露聚糖酶的分离纯化研究医药上应用具有较大的潜力硫,、、酶的分离提纯与一般蛋白质提纯类似都是经酸馁分级沉淀超滤浓缩阴离子交换层析和凝胶,,,过硫酸按沉淀层析及电泳技术选择适当的条件过滤层析后由枯草芽抱杆菌。,可以得到较纯的酶但是随着近年来的发展提纯培养滤液得到了常规凝胶电泳一条带的。。一技术已经逐步向工业生产靠拢中性甘露聚糖酶该酶具有与其它已知同类,田亚平等人〔‘”〕利用硫酸按分级沉淀凝胶过,〕一酶相类似的性质用测得该酶分子量滤层析,。和经基磷灰石吸附层析相结合及二次轻基为等电点为磷
