重度饮酒对大鼠脑内α-synuclein表达的影响

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1、研究生学位论文独创性声明{}弓了盈。本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。研究生签字：本人完全了解河北医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属河北医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时属名单位为河

2、北医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。研究生签字：赵伟导师签字：目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．7研究论文重度饮酒对大鼠脑内0【．synuclein表达的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·17附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·23讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·24参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·28综述0【．突触核蛋白在神经障碍中的病理作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··34致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯59个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60中文摘要重度饮酒对大鼠脑内Q—synuclein表达的影响摘要目前人类正常认知老化的界限还不明确，痴呆前的临床特征和痴呆综合症正在研究中。痴呆是一种综合症，其特点为记忆损害，以及其他认知功能下降到一定程度，导致患者的社会和职业功能明显受损。据估计，痴呆的发病率在65岁以上人群约为6％，其发病率随着年龄的增长呈指数增长，在95岁以上人群中，痴呆的发病率高达40．70％。在西方国家，最常见的痴呆是阿尔茨海默病(Alzheimer’Sdisease，AD)和血管性痴呆(v

5、asculardementia，vat))，在所有痴呆中分别占70％和15％。长期重度饮酒与Wemicke．Korsakoff's综合症有关，也可能是产生临床痴呆(酒精性痴呆)的一个的决定因素，但其机理还不十分明确。0【．突触核蛋白在脑内高表达，是路易体的主要组成部分，后者在多巴胺能神经元内沉积，是帕金森病(Parkinson’Sdisease，PD)和其它神经变性疾病的特征。然而，其生理作用还不清楚。已提出的0【．突触核蛋白的生理功能包括调节神经递质的释放和重摄取，参与突触前囊泡的循环以及分子伴侣作用。Ot．突触核蛋白在脑内多巴胺能神经元的表达水平很高，

6、这表明此蛋白可能通过多种机制负向调节多巴胺能神经元的功能。研究表明，Ot．突触核蛋白可抑制与多巴胺合成有关的酶的效能，或降低其表达，影响多巴胺转运体的功能，抑制重复刺激时的多巴胺释放。重度饮酒对脑内cc．突触核蛋白表达水平的影响还不是十分清楚。目的：观察分析重度饮酒(乙醇处理)大鼠脑内相关脑区Ot．突触核蛋白(仪．synuclein)的表达变化，为酒精性痴呆的可能机制提供直接的形态学资料。方法：从河北医科大学实验动物中心选取36只3月龄、雄性Wistar大鼠，随机分作对照组和乙醇处理组，对照组大鼠正常饲养，乙醇处理组以20％酒精代替饮水。实验动物饲养3个月

7、。1免疫组织化学研究：大鼠深麻醉下经心灌注固定取脑及后固定，置于4"C蔗糖溶液过夜。把需要脑块行冠状位切片，进行免疫组织化学染色，贴片、封片。用HPIAS．1000高清晰度彩色病理图文分析系统分析所中文摘要观察脑区仅．synuclein光密度值。2流式细胞学检测：大鼠断头取所需脑组织，搓洗、收集细胞悬液，离心。加入兔抗0【．synuclein多克隆抗体室温孵育，洗涤，加入羊抗兔藻红素蛋白(PE．IgG)二抗工作液避光室温孵育，加入PBS10ml离心，弃上清，铜网过滤后上机检测，电脑记录，计数0【．synuclein的表达量X．mode值。3免疫印迹检测：大

8、鼠断头取脑组织，裂解、研磨，取上清，蛋白定量，分装，进行电泳、电转