胡黄连对缺血再灌注大鼠脑内nmdar1 mrna表达的影响

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1、胡黄连对缺血再灌注大鼠脑内NMDAR1mRNA表达的影响：张伟银建军杨学伟杜芳【关键词】缺血［摘要］目的观察缺血再灌注模型大鼠脑内N甲基D天门冬氨酸受体1（NMDAR1）mRNA的变化，探讨胡黄连对神经元的保护作用。方法参照线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型，胡黄连干预，原位杂交方法观察皮质、纹状体NMDAR1mRNA表达。结果对照组缺血侧皮质区、纹状体区于缺血再灌注1d时NMDAR1mRNA表达达高峰，7d后逐渐下降，但各时间点与假手术组比较，均有显著性差异F=3.6、.2,q=11.4~16.7,P<0.01）；

2、胡黄连治疗组大鼠脑皮质与纹状体NMDAR1mRNA基本接近假手术组，明显低于对照组(t=9.43~10.55,P<0.01)。结论胡黄连对脑缺血再灌注损伤神经元有一定保护作用，其机制可能与下调脑内NMDAR1mRNA表达有关。［关键词］胡黄连；脑缺血；N甲基D天门冬氨酸受体1;大鼠，DAR1)mRNAfolloicreperfusioninratbrain,andtoinvestigateneuroprotectiveeffectsofpicrorhizaeonneurons.MethodsThecerebral

3、schemicreperfusionmodelsinratadebyintraluminalthreadmethodandinterferedbypicrorhizae.TheexpressionofNMDAR1mRNAincortexandstriatuminedRNApeakedatonedayonischemiccortexandstriatumanddescendedgraduallyaftersevendays.paredoperationgroup,thereepoint（F=3.6,7.2;q=11.4-

4、16.7;P<0.01）.Inthecortexandstriatumofpicrorhizaetreatedgroup,theexpressionofNMDAR1mRNApositiveneuronsoperationgroup,butsignificantlyloischemicreperfusioninjurybydecreasingtheexpressionofNMDAR1mRNAinthebrain.［KEYDAR）是中枢神经系统内一类重要的兴奋性氨基酸（EAAs）受体，广泛存在于中枢和外周神经系统［1

5、］。脑缺血再灌注后，引起局部脑组织兴奋性氨基酸，尤其是谷氨酸和天门冬氨酸大量释放，可过度激活NMDA受体，从而介导兴奋性氨基酸的神经毒性作用，即通过NMDA受体激活电压门控Ca2+通道，促使Ca2+病理性内流增加，细胞内Ca2+的积聚导致神经元发生退行性改变和坏死［2,3］，而NMDA受体拮抗剂对缺血性神经损伤有保护作用［2］。本实验通过观察胡黄连对脑缺血再灌注模型大鼠脑内NMDAR1mRNA表达的影响，以探讨其对损伤神经元的保护机制。1材料和方法1.1实验动物和分组健康雄性CAO）再灌注模型，模型成功的标志为动物苏醒

6、后，出现左侧Horner征，提尾右前肢内收屈曲，爬行时右侧画圈。对照组又分为缺血1.5h再灌注6h、1d、3d、7d、14d、21d组，每组4只；治疗组又分为缺血1.5h再灌注后14d、21d组；假手术组仅插入10mm尼龙线，其余步骤同对照组。1.2处理方法对照组：模型成功后即刻灌胃，每天以生理盐水灌胃1次，每次3mL。假手术组：每天同步以生理盐水灌胃1次，每次3mL。治疗组：每天同步以胡黄连甲醇提取物灌胃1次，每次3mL。1.3脑组织取材各组大鼠术后不同时间点用100g/L戊巴比妥钠麻醉，暴露心脏，先以生理盐水200

7、mL经升主动脉冲洗，再以40g/L多聚甲醛200mL灌注固定，持续30min后取脑组织备用。取材范围为前囟后2.0mm至前囟前3.0mm。脑组织常规脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋，连续冠状切片（片厚5μm），粘于用多聚赖氨酸处理的切片上，室温保存备用。1.5统计学处理采用德国欧波同公司VIDAS图像分析系统，将标本的图像输入电脑，对阳性细胞作吸光度扫描，获得吸光度值。应用SPSS10.0统计软件包进行分析。数据采用±s表示。组间比较采用方差分析和t检验。2结果假手术组脑组织皮质区和纹状体区NMDAR1mRNA呈基础水平的表

8、达，对照组缺血侧皮质区、纹状体区于缺血再灌注6h后阳性细胞着色开始加深，1d时达到高峰，以后表达逐渐减弱，但各时间点与假手术组比较，差异均有显著性（P<0.01）；治疗组大鼠脑皮质与纹状体区NMDAR1mRNA基本接近假手术组，但明显低于对照组(P<0.01)。见表1。3讨论NMDAR是中枢神经系统内一类重要的EAAs