胡黄连对大鼠缺血脑组织神经营养因子的影响论文

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1、胡黄连对大鼠缺血脑组织神经营养因子的影响论文杨学伟季旭明郭云良杜芳【摘要】目的观察大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织神经生长因子（NGF）的变化，探讨胡黄连抗脑缺血再灌注损伤的机制。方法参照线栓法制作脑缺血再灌注模型，免疫组织化学方法观察胡黄连对脑皮质、纹状体NGF表达的影响。结果手术组缺血侧皮质区和纹状体区于缺血再灌注1d时NGF表达至高峰，3d后逐渐下降，14d降至基础水平；胡黄连治疗组大鼠脑皮质与纹状体的NGF阳性细胞显著增加,与假手术组及模型组相比差异有显著性（F=4.8、9.1，q=13.6～17

2、.2；t=12.6～18.4,P0.05）。结论胡黄连可使脑缺血再灌注损伤后脑组织内NGF表达增加。【关键词】胡黄连；中草药；脑；再灌注损伤；神经生长因子［ABSTRACT］ObjectiveToobservethechangesofnervegroialreperfusionandthemechanismofPicrorhizaeonanticerebralischemiadamage.MethodsAcerebralischemicreperfusionmodelinalthreadmetho

3、dandtheeffectsofPicrorhizaeonexpressionofNGFinpalliumandstriatumdetectedimmunohistochemically.ResultsTheexpressionofNGFincerebralcortexandstriatumatischemialsideofoperationgroupreachedthepeakatoneday,declinedgraduallyafterthreedays,returnedtobasallevelo

4、nday14;inPicrorhizaetreatedgroup,theNGFpositivecellsinthecortexandstriatumincreaseddramatically,thedifferencesoperationandmodelgroups(F=4.8,9.1;q=13.6-17.2;t=12.6-18.4,P0.05).ConclusionPicrorhizaecanincreasethenumberofNGFinbrainfolloialreperfusionin

5、jury.［KEYedicine,Chineseherbal;Brain;Reperfusioninjury;Nervegrom，其余步骤同模型组。1.2治疗方法模型组模型成功后即可灌胃，每天灌胃生理盐水1次，每次3mL。假手术组每天灌胃生理盐水1次，每次3mL。治疗组每天灌胃胡黄连甲醇提取物1次，每次3mL。1.3脑组织取材各组大鼠于术后不同时间点取材，10g/L戊巴比妥钠麻醉，暴露心脏，先以生理盐水200mL经升主动脉冲洗，再以40g/L多聚甲醛200～300mL灌注固定，持续30min后取脑备用

6、。取材范围为前囟后2.0mm至前囟前3.0mm。脑组织常规脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋，连续冠状切片（片厚5μm），粘于用多聚赖氨酸处理的玻片上，室温保存备用。1.4免疫组化检测NGF免疫组织化学试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供。按说明书操作，标本切片，脱蜡，梯度乙醇至双蒸水；依次滴加H2O2、封闭血清、一抗（1∶100）及二抗后，DAB显色，镜下根据细胞着色情况控制反应时间，双蒸水冲洗终止反应，随后脱水、透明、封片，光镜下观察，细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性细胞。取部分切片不加一抗，以0.1mol/

7、L的PBS代替，用以观察一抗特异性。1.5数据与统计学处理参考PAXINOS和IMAT,TAKAKURAK,etal.AmeliorationofdelayedneuronaldeathinhippocampusbynervegroinalsJ.ProatlAcadsciUSA,1992,89:2639.5ISHIMARUH,TAKAHASHIA,IKARASHIY,etal.NGFdelaysratherthanpreventstheCholinergicterminaldamageanddelay

8、edneuronaldeathinthehippocampusafterischemiaJ.BrainRes,1998,789:194200.7CHENGB,MATTSONMP.NGFandBFGFprotectratandhumancentralneuronsagainsthypoglycemicdamagebystabilizingcalciumhomeostasisJ.Neuron,1991,7:1031.8SHIMOHAMAS,DGAARAY,