脑缺血预处理对大鼠脑内nogo-a及受体ngr表达的影响

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityForthedegreeofMasterEffectsofCerebralIschemicPreconditioningontheExpressionsofNogo—AandNgRinRatsByJiaoYimingTutor:WangJinlanDepartmentofNeurologyTheSecondClinicalCollegeofZhengzhouUniversityApril2013原创性声明IUlIIIIIIIIIII

2、IIIY2315354本人郑重声明所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者焦义明/T妻.文丑只学位论文使用授权声明日期2013年5月29日劢&上功本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论

3、文的复印件和电子版,允许论文被查阅和节阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者焦义明弋叁义明日期2013年5月29Et∞艮上研摘要脑缺血预处理对大鼠脑内Nogo.A及受体NgR表达的影响研究生焦义明导师王金兰郑州大学第二临床学院神经内科河南郑州450014背景和目的脑缺血预处理(

4、ischemicpreconditioning,IP)是指机体对短暂性缺血的适应性反应,能增强神经元对再次缺血的耐受性。脑缺血预处理对脑缺血损伤的内源性保护涉及多种分子机制,有自由基、细胞代谢产物、兴奋性神经递质、腺苷、热休克蛋白及钙超载等学说,但其确切的机制目前仍不清楚。有研究表明,高压氧预处理可抑制大脑皮质Nogo.A及NgR的表达,从而可以改善大鼠脑缺血再灌注损伤时的认知功能。Nogo.A是目前已知最强的轴突生长抑制因子,在髓鞘损伤后具有强烈的抑制轴突再生作用,NgR(Nogoreceptor)是其

5、受体,介导神经生长抑制作用,是影响神经修复的重要通路。有研究表明大鼠脑缺血缺氧后Nogo-A及NgR表达均增高,强烈抑制神经纤维的再生,从而导致神经功能的下降。然而,脑缺血预处理能否通过抑$1JNogo.A及NgR的表达来对脑缺血损伤起保护作用,目前尚未见报道。本研究通过建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,来观察脑缺血预处理后不同时间点Nogo.A及受体NgR的表达,探讨脑缺血预处理能否通过抑制Nogo-A及NgR的表达来对脑缺血损伤产生保护作用。方法健康雄性的SD大鼠108只,随机分为三组:假手术组(sha

6、m.operated,S)摘要组,缺血再灌注(ischemiareperfusion,I/R)组和缺血预处理(ischemicpreconditioning,IP)组,每组取缺血再灌注1d、3d及7d3个时间点,分成3个亚组,每个亚组12只大鼠。线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,脑缺血预处理10rain,3d后进行再次缺血2h,各组再灌注ld、3d及7d后处死大鼠取脑组织,采用免疫组化染色检测大鼠缺血侧皮质Nogo.A及NgR蛋白的表达,采用RT-PCR方法检测大鼠缺血侧皮质Nogo—AmRNA的表达。

7、结果1.神经功能缺损评分假手术组大鼠无神经功能缺损,I/R组与IP组均有不同程度的神经功能缺损,IP组神经功能缺损较I/R组能明显改善,神经生物学评分有显著差异(p

8、异(尸<0.05)。3.NgR免疫阳性细胞的变化情况假手术组在缺血皮质区域见有少量的胞浆染色的NgR阳性细胞。而在I/R组,缺血皮质区域可见有较多的胞浆染色深的NgR阳性细胞,且以3d为最多,与假手术组比较具有统计学差异(P<0.05);实施预处理后,缺血侧皮质NgR阳性细胞数较I/R组有所降低,与I/R组相应亚组比较具有统计差异(P<0.05)。4.Nogo.AmRNA的表达变化情况假手术组在缺血皮质区见有少量的Nogo.A

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