苏云金芽胞杆菌ctc菌株的s-层蛋白可以形成伴胞晶体

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1、!"卷#期微生物学报&’()!"0’)#"$$"年%"月!"#$%&"’()&(*(+&"$,&-&"$*+,+-.+/"$$"!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!苏云金芽胞杆菌!"!菌株的#$层蛋白可以形成伴胞晶体"朱晨光孙明""喻子牛（华中农业大学生命科学技术学院农业部农业微生物重点实验室武汉!1$$4$）摘要：苏云金芽胞杆菌（!"#$%%&’()&*$+,$-+’$’）ABA菌株产生卵圆形伴胞晶体，晶体蛋白分子量为%$$C

2、*；透射电子显微镜观察结果表明该菌株有D@层结构，而且在母细胞内可以形成伴胞晶体和D@层的初体结构；其蛋白基因导入苏云金芽胞杆菌无晶体突变株EFE%4%后，扫描电子显微镜观察结果表明转化子能形成晶体，而其形状与ABA菌株的相同；转化子晶体蛋白的分子量大小也与ABA菌株的相同，为%$$C*。以上实验结果结合以前晶体蛋白0@末端测序和基因核苷酸序列，表明苏云金芽胞杆菌ABA菌株的D@层蛋白可以形成伴胞晶体。关键词：苏云金芽胞杆菌，D@层，伴胞晶体，电子显微镜中图分类号：G"!文献标识码：H文章编号：

3、$$$%@#"$2（"$$"）$#@$#4$@$ID@层又称细胞表面层，是由蛋白质或糖蛋白构成的单分子晶格状聚合层，它普遍存在［%，"］于许多古细菌与真细菌的细胞表面，完全覆盖了细胞的表面。D@层蛋白在形成过程中具有较强的自我组装能力，其0@末端有信号肽结构以及三个与蛋白最终锚定在细胞表面［1］相关的区域（-’J:K）。苏云金芽胞杆菌（!"#$%%&’()&*$+,$-+’$’）在芽胞期特异产生由蛋白质组成的不同类型［!］的伴胞晶体，分别对鳞翅目、双翅目和鞘翅目昆虫以及螨类和动植物寄生线虫有毒性

4、。苏云金芽胞杆菌与蜡状芽胞杆菌（!"#$%%&’#-*-&’）、炭疽芽胞杆菌（!"#$%%&’"+()*"#$’）是极为［I］相似的种群，它与后两者的区别只在于它可形成伴胞晶体。苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体一般呈菱形、方形或不规则形，而本文研究的ABA菌株的伴胞晶体则成椭圆形或圆形。生物测定表明ABA菌株对小菜蛾、小猿叶甲和库蚊幼虫三个不同目的昆虫均未显毒力。［#］其晶体蛋白分子量为%$$C*，现已分离到编码该蛋白的基因#(（#L+7E97CHM$%""2$），从该蛋白基因#(#推导的蛋白全序列（未

5、发表资料）与炭疽芽胞杆菌的D@层蛋白（’".N+7+，［4］L+7E97CO?FEPQ1#2!#）序列有34RIS的同源性；在决定D@层蛋白锚定在细胞表面的结构区域（D@(9T+/;’-’(’NT-’J:K）内，两者有24S的同源性。本文对ABA菌株及其对照菌株的细胞和伴胞晶体进行了电子显微镜观察，结果表明ABA菌株是一株有D@层的苏云金芽胞杆菌，并且其D@层蛋白在芽胞形成期可以形成伴胞晶体。"国家自然科学基金资助项目（1234$$1#和1$$3$$%1）""通讯联系人-235678-9:();

6、<96)+=6),7作者简介：朱晨光（%243>），浙江嵊州人，华中农业大学生命科学技术学院生化与分子生物学学科博士研究生。研究方向：芽胞杆菌分子生物学。?@-9:(：.:’<;68"%,7),’-收稿日期："$$%@%"@"4，修回日期："$$"@$!@%$A期朱晨光等：苏云金芽胞杆菌"#"菌株的8G层蛋白可以形成伴胞晶体AF!!材料和方法!"!菌株和质粒见表!。苏云金芽胞杆菌"#"菌株为本室分离。红霉素（$%&）抗性浓度为’(。!)*&+表!菌株和质粒#,-./!0,12/%3,.42%,3

7、54,567.,4&36482%,354,567.,4&364"9,%,12/%3423148:;%1/4!<"#$%=>("&’($??#$)"@!AB（$CD$)"*#E!(）+&,-!F./"0!/1,0!82:%/6352934.,-23.0BA4+%G!./$0!5)"%$$’&4+’.%12%/1&%&"#"4/%:2H7/>’，5:G2:I3132H82:%/6352934.,-［A］5)"%$$’&4+’.%12%/1&%&0E0!F!"%H&;2,52:JK0#G!?AL，7.

8、,4&36./4482:%/6352934.,-［!D］?N!O-!"#PQG6$)%J%,)&/521:52,3535)J;.."4")/5/35M.,4&3670E0BC’［A］82:%/6352934.,-!"#P%G0""%432/:J7QR’B’(M.,4&367>#LD?49;22./S/12:%，T&7%，$%&%，AN?O-82:%/6352934.,-［!!］M.,4&3670E0BC’GLD?8G.,H/%)/5/3570E0BC’U,4354/%2/6352:7>#LD?,