地黄寡糖对脑缺血再灌注所致痴呆大鼠学习记忆功能的影响

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1、中国药理学与毒理学杂志２００８年６月；２２（３）：１６５－１６９ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００８Ｊｕｎ；２２（３）：１６５－１６９·１６５·地黄寡糖对脑缺血再灌注所致痴呆大鼠学习记忆功能的影响１１１２２２杨菁，石海燕，李莹，王洪新，金英，刘春娜（辽宁医学院１．细胞生物学及新药开发重点实验室，２．药理学教研室，辽宁锦州１２１００１）摘要：目的研究地黄寡糖对脑缺血再灌注致痴呆年中药及天然药物在痴呆的治疗中取得了较好的效大鼠学习记忆功能的影响及其可能机制。方法采果，如“地黄饮子”和“六味地黄汤”均被证明对痴呆［３

2、］用ｉｐ硝普钠及双侧颈总动脉夹闭１０ｍｉｎ再灌具有治疗作用，但由于中药的成分复杂，不同批１０ｍｉｎ夹闭１０ｍｉｎ的方式制备脑损伤模型。地黄次药物的化学成分和含量不尽相同，导致疗效不稳－１寡糖６．４，３２．０或１６０．０ｍｇ·ｋｇ于造模前３ｄ至造定。因此对其进行纯化及有效的质量控制是中药现模后７ｄｉｐ给药，每日１次，共１０ｄ。于术后ｄ７开代化的大势所趋。本研究用含寡糖８５％以上的地始进行水迷宫实验测定大鼠学习记忆能力；术后ｄ黄寡糖（Ｒｅｈｍａｎｎｉａｇｌｕｔｉｎｏｓａｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ）提取１０取海马，ＨＰＬＣ

3、异硫氰酸苯酯柱前衍生法测定海液，以双侧颈总动脉夹闭再灌注配合ｉｐ硝普钠马谷氨酸（Ｇｌｕ）含量；Ｗｅｓｔｅｒｎ蛋白印迹法测定海马（ｓｏｄｉｕｍｎｉｔｒｏｐｒｕｓｓｉｄｅ）减压法建立痴呆模型，探讨地磷酸化细胞外信号调节激酶２（ｐＥＲＫ２）含量。结黄寡糖对痴呆大鼠学习记忆能力的影响及可能机果模型组大鼠学习记忆能力明显下降，海马Ｇｌｕ制，为地黄寡糖的开发应用提供理论和实验依据。含量明显升高，ｐＥＲＫ２含量降低。地黄寡糖可剂量依赖性地增强缺血再灌注损伤大鼠的学习记忆能１材料与方法力，降低海马Ｇｌｕ含量，提高海马ｐＥＲＫ２含量。结论

4、地黄寡糖可以改善脑缺血再灌注致痴呆大鼠的１．１实验动物、药品及主要仪器学习记忆能力，这种作用可能与抑制Ｇｌｕ过量释放、健康雄性ＳＤ大鼠，体重２５０～２８０ｇ，由辽宁医进而使ＥＲＫ２信号途径正常发挥有关。学院实验动物中心提供。注射用硝普钠由开封康诺－１关键词：地黄寡糖；脑缺血；再灌注损伤；学习；记药业有限公司生产，用注射用水溶解成１ｇ·Ｌ的溶忆；谷氨酸盐类；细胞外信号调节激酶；海马液，现用现配，避光保存。谷氨酸（ｇｌｕｔａｍａｔｅ，Ｇｌｕ）对照品购于中国药品生物制品检定所。兔抗磷酸化细中图分类号：Ｒ２８６．１，Ｒ９７１胞外信号调

5、节激酶１／２（ｐｈｏｓｐｈｏｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇｎａｌ文献标识码：Ａｒｅｇｕｌａｔｅｄｋｉｎａｓｅ１／２，ｐＥＲＫ１／２）多克隆抗体，购于文章编号：１０００３００２（２００８）０３０１６５０５美国Ｐｒｏｍｅｇａ公司。地黄，产自河南省武涉县西陶ＤＯＩ：１０．３８６７／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００３００２．２００８．０３．００２镇，由锦州奥鸿药业有限责任公司质量部按照２００５年版《中国药典》一部地黄质量标准检验，符合规缺血性脑血管病是引起中、老年人痴呆的主要［４］定。地黄寡糖，按如下方法制备，即取１０ｋｇ地黄［１

6、－２］病因之一。由于其病因、机制和临床表现的复粉碎成小于２ｍｍ的颗粒，用２５Ｌ注射用水浸泡杂性，至今还没有一种药物取得公认确切疗效。近５ｈ，离心取上清得上清液约２２Ｌ，将上清液于３５℃下真空浓缩至１０Ｌ，加入９５％乙醇４０Ｌ混合，离心收稿日期：２００７０８２０接受日期：２００８０３１７取上清０．４５μｍ膜过滤，得过滤液４８Ｌ，过滤液于基金项目：辽宁省高校分子细胞生物学与新药开发重３５℃下真空浓缩，得浓缩液１０Ｌ，用５ｋｕ的超滤器点实验室开放课题（２００６ＬＹ０７）；辽宁省教育厅资助课题将浓缩液超滤得超滤液约９．５Ｌ，将

7、超滤液用活性（２００６０５２８）炭吸附得地黄寡糖提取液约９．５Ｌ，膜过滤除菌分作者简介：杨菁（１９６８－），男，辽宁省人，副教授，理学博士，主要从事神经生物学及相关药物研究。装。按质量标准检测，符合规定，即总固体含量为－１联系作者Ｅｍａｉｌ：ｊｚｙａｎｇｊｉｎｇ＠ｇｍａｉｌ．ｃｏｍＴｅｌ：１８～２２ｇ·Ｌ。苯酚硫酸法测定总糖含量８５％以（０４１６）４６７３４６５上，其中含水苏糖５５％～６５％，梓醇６％～１２％。用·１６６·ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００８Ｊｕｎ；２２（３）高效液相色谱法，以ＴＳＫ２０００

8、ｓｗｘｌ色谱柱为固定次，每次采用不同象限入水点。训练时将大鼠面朝池相，乙腈三氟醋酸水（４０∶０．１∶６０）为流动相，检测壁轻轻放入水池，同时启动记录装置，记录大鼠寻找波长１９０ｎｍ，将先于胰岛素保留时间的峰视为高分平台所用时间，如果１２０ｓ内没有找到，则将其放置于子物质，