瘦素对人冠状动脉内皮细胞crp和pai-1表达的影响

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1、中图分类号＆§垒!：垒UDC610硕士学位论文学校代码!Q5兰三密级公珏瘦素对人冠状动脉内皮细胞CRP禾IZIPA卜1表达的影响TheeffectsofleptinontheCRPandPAI--1expressioninhumancoronaryarteryendothelialcells作者姓名学科专业研究方向学院(系、所)指导教师李强临床医学内科学(心血管内科)中南大学湘雅医学院附属海口医院陆士娟教授论文答辩日期圣兰：!：盟答辩委员会中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论

2、文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：—塑日期：2型一年』月望日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向

3、社会公众提供信息服务。日期：型L年』月卫日瘦素对人冠状动脉内皮细胞CRP和PA

4、一1表达的影响摘要目的：观察瘦素(Leptin，LP)对人冠脉内皮细胞(humancoronaryarteryendothelialcellS，HCAECs)C一反应蛋白(C-reactiveprotein，CRP)和纤溶酶原激活物抑制剂一1(Plasminogenactivatorinhibitor一1，PAI—1)表达的影响，探讨LP与冠脉血栓形成间的关系。方法：在实验中使用克隆的人冠脉内皮细胞(HCAECs)，取3—5代细胞，当细胞生长至70％一80％融合时，将细胞分为六组，每

5、组各六个复孔，工具对照组为无内皮细胞生长因子(endothelialcel1growthfactor，ECGF)DMEM，其余五组HCEACs分别与不同浓度的瘦素(Ong／ml、20ng／ml、50ng／ml、lOOng／ml、200ng／m1)作用48小时，收集条件培养基通过酶联免疫吸附法(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)测定CRP和PAI一1的浓度。蛋白免疫印迹法(WesternBlot，wB)检测细胞内CRP和PAl一1的蛋白表达量。结果：(1)比较六组细胞培养基中CRP水平，50—200ng／ml的瘦素处理组均高

6、于正常对照组，其诱导效应随瘦素浓度增加而增强，差异有统计学意义(P=O．000，0．000，0．000，<0．05)；(2)比较六组细胞培养基中PAl一1水平，50一200ng／ml的瘦素处理组均高于正常对照组，其诱导效应随瘦素浓度增加而增强，差异有统计学意义(P=O．000，0．000，0．000，<0．05)；(3)比较六组细胞内CRP相对表达量，50一200ng／ml的瘦素处理组均高于正常对照组，其诱导效应随瘦素浓度增加而增强，差异有统计学意义(P=O．000，0．000，0．000，<0．05)；(4)比较六组细胞内PAI一1相对表达量，50—200ng

7、／ml的瘦素处理组均高于正常对照组，其诱导效应随瘦素浓度增加而增强，差异有统计学意义(户0．000，0．000，0．000，<0．05)。结论：瘦素能够呈剂量依赖性地增加人冠脉内皮细胞的CRP和PAI一1蛋白的表达。表明瘦素具有促炎和促栓的作用。这是其作为一种独立心血管危险因素的重要原因，提示瘦素作为潜在的药物靶点可以用于干预心血管疾病。图7幅，表4个，参考文献44篇。关键词：人冠脉内皮细胞；瘦素；C反应蛋白；纤溶酶原激活物抑制齐,J-1；血栓分类号：R541．4TheeffectsofleptinontheCRPandPAI一1expressioninhuma

8、ncoronaryarteryendothelialcellsABSTRACTObjective：ToobservetheeffectofLeptin(LP)ontheexpressionofC—reactiveprotein(CRP)andPlasminogenactivatorinhibitor-l(PAI-1、)inthehumancoronaryarteryendothelialcells(HCAECs)．ToinvestigatetherelationshipbetweenLPandcoronarythrombosis．Methods：Experime

9、ntswereperfo