wnt_β-catenin信号通路调控hepg2细胞代谢的机制研究

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1、广东药科大学硕士研究生毕业论文分类号：___________密级:UDC：___________Wnt/β-catenin信号通路调控HepG2细胞代谢的机制研究姓名：杨靖学号：2111548032院系：中药学院专业：中药学研究方向：中药及复方药理和毒理的研究导师姓名：郭姣教授论文提交日期：年月日论文答辩日期：年月日学位授予单位：广东药科大学二○一八年五月广东药科大学硕士研究生毕业论文广东药科大学硕士研究生毕业论文StudyonthemechanismoftheregulatingthemetabolismofHepG2byWnt/β-cateninsignalingpathwayCand

2、idate：YangJingStudentID：2111548032Affiliation：CollegeoftheTraditionalChineseMedicineAcademicDegreeAppliedfor：MasterofMedicineSpeciality：TraditionalChineseMedicineSupervisor：Prof.GuoJiaoDayofDefence：May,2018Degree-Conferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUniversityMay,2018广东药科大学硕士研究生毕业论文广东药科大学

3、硕士研究生毕业论文学位论文知识产权归属声明本学位论文是广东药科大学郭姣教授主持的广东省科技厅国际合作项目“基于糖组学技术的组分中药调节糖脂代谢的机制研究”（2015A050502050）、广东省科技厅国际合作基金建设项目“代谢病中西医结合防治国际合作基地建设”（2016B050501003）的部分内容，本论文研究成果知识产权归郭姣教授所有。特此声明。广东药科大学硕士研究生毕业论文Wnt/β-catenin信号通路调控HepG2细胞代谢的机制研究中文摘要背景：进入21世纪以来，社会经济的发展日趋迅速，人们的生活方式也在发生着巨大的改变，伴随着这些改变，II型糖尿病、肥胖症、高脂血症、非酒精性

4、脂肪肝等代谢相关性疾病的发生率越来越高。肝脏是机体的十分重要的消化及代谢器官，许多代谢性疾病与肝脏的关系是密不可分的。肝细胞的代谢决定着肝脏的代谢，肝细胞的代谢受到许多种不同的通路及机制的调控，Wnt/β-catenin信号通路即是其中之一，它在肝脏的稳态及代谢中具有重要的调节作用，但是这种调节作用的具体机制仍然不是十分清楚，所以，研究Wnt/β-catenin信号通路是如何起到对肝细胞代谢的的调控作用具有十分重要的意义。目的：本课题希望通过实验研究来验证Wnt/β-catenin信号通路对于HepG2细胞的调控作用，并阐明其调控机制。方法：首先使用Wnt/β-catenin信号通路的激活

5、剂CP21R7来激活HepG2细胞的Wnt/β-catenin信号通路，之后利用RT-PCR的方法来检测Wnt/β-catenin信号通路靶点基因（CyclinD1、TCF1、c-jun等）的改变情况以检测其激活效果，然后利用RT-PCR、WesternBlot、I广东药科大学硕士研究生毕业论文ELISA、Seahorse细胞能量代谢仪等检测细胞代谢相关基因（FGF21、PPARγ、SCD1等）、相关蛋白（FGF21、IRS1、P-IRS1、P-AKT等）、以及细胞有氧呼吸（OCR）和糖酵解（ECAR）能力的改变，最后利用RT-PCR方法和WesternBlot方法进行通路筛选。结果：1.

6、试验结果发现使用激活剂CP21R7激活Wnt/β-catenin信号通路后，HepG2细胞的Wnt/β-catenin信号通路靶点基因CyclinD1、TCF1、c-jun等与Control组相比具有显著性的增加；2.当Wnt/β-catenin信号通路被激活之后，HepG2细胞的代谢相关基因FGF21、PPARγ、SCD1等与Control组相比有显著性改变；3.当Wnt/β-catenin信号通路被激活之后，HepG2细胞的代谢相关蛋白FGF21、IRS1、P-IRS1、P-AKT等与Control组相比有一定量的改变；4.当Wnt/β-catenin信号通路被激活之后，HepG2细胞

7、有氧呼吸（OCR）和糖酵解（ECAR）能力与Control组相比没有显著改变；5.通过通路筛选，发现内质网应激通路（ERS）在Wnt/β-catenin信号通路被激活后被显著激活。结论：1.当Wnt/β-catenin信号通路被激活之后，HepG2细胞的代谢能力确实出现了显著的改变，说明Wnt/β-catenin信号通路对HepG2细胞的代谢能力具有重要的调节作用；II广东药科大学硕士研究生毕业论文2.Wnt/β-cat