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1、第26卷第1期海洋水产研究Vol.26,No.12005年2月MARINEFISHERIESRESEARCHFeb.,2005·综述·AFLP分子标记技术的发展及其在海洋生物中的应用1211王伟继岳志芹孔杰王清印(1中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071)(2中国海洋大学海洋生命学院,青岛266003)摘要AFLP分子标记技术是一种建立在PCR技术和RFLP标记基础上的新的DNA指纹技术,具有多态性丰富、结果稳定可靠、重复性好、所需DNA量少,且可以在不需预先知道基因序列的情况下进行研究等特点,现已被广泛应用于遗传图谱构建、遗传多样
2、性分析、系统进化及分类学、遗传育种和种质鉴定以及基因定位等方面。本文简要介绍AFLP分子标记技术的原理、特点、发展及其在海洋生物中的应用现状及前景展望。关键词AFLP分子标记海洋生物中图分类号Q7文献识别码A文章编号100027075(2005)0120080206DevelopmentofAFLPanditsapplicationinmarineorganism1211WANGWei2jiYUEZhi2qinKONGJieWANGQing2yin(1YellowSeaFisheriesResearchInstitute,ChineseAcad
3、emyFisherySciences,Qingdao266071)(2OceanUniversityofChina,MarineLifeCollege,Qingdao266003)ABSTRACTAFLP(AmplifiedFragmentLengthPolymorphism)isoneofthenewlydevel2opedDNAfingerprinttechniquesbasedonPCRandtheRFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism)techniques.Highpolymorphisms
4、,goodreproducibility,lowusageofDNAtemplateamountandnorequirementofpriorknowledgeofgenomesequencesareadvantagesofAFLP.AFLPhasbeenappliedwidelyinconstructionofgeneticlinkagemap,assessmentofge2neticpolymorphism,pedigreeanalysis,breedingpracticeandgenepositioning.Inthispaper,the
5、principle,characteristicsofAFLPanditsapplicationsinmarinebiologywereintroducedanddiscussed.KEYWORDSAFLPMolecularmarkerMarineorganismAFLP(AmplifiedFragmentLengthPolymorphism)———扩增片段长度多态性技术,又称为SRFA(Se2lectiveRestrictionFragmentAmplification),是由荷兰Keygene公司科学家ZebeauMarc和VosPiete
6、r等发展起来的一种检测DNA多态性的新方法,于1993年获得欧洲专利局专利。AFLP结合了RFLP的稳定性和PCR技术的高效性,同时又避免了RFLP受探针限制的因素,因而可产生丰富而稳定的遗传标记,被认为是一国家863青年项目(2002AA628070)和国家863项目(G2003AA603021)共同资助收稿日期:2003210213;接受日期:2004203203作者简介:王伟继(19722),男,助理研究员,主要从事海洋生物遗传育种学和分子生物学研究.E2mail:wangwj@ysfri.ac.cn,Tel:(0532)5823291©
7、1994-2009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net第1期王伟继等:AFLP分子标记技术的发展及其在海洋生物中的应用81种理想有效的分子标记技术,现已被广泛应用于遗传图谱构建、遗传多样性分析、系统进化及分类学、遗传育种和种质鉴定以及基因定位等方面。1AFLP分子标记的原理和特点AFLP(Vosetal.1995)是建立在RFLP基础上的选择性PCR,其原理是将DNA进行限制性酶切,再将特定的接头连接在酶切片段的两端
8、,形成一个带接头的特异性片段,以此为模板,以接头序列和限制性内切酶的切点序列为基础设计引物,进行PCR扩增。关于AFLP分子标记原理详尽的介绍的综述较
