AFLP分子标记技术的发展及其在蜜蜂学研究中的应用

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1、昆虫知识ChineseBulletinofEntomology-313·AFLP分子标记技术的发展及其在蜜蜂学研究中的应用李志勇赵惠燕葛凤晨薛运波(1．西北农林科技大学植保学院陕西杨凌712100；2．吉林省养蜂科学研究所吉林132108)Developmentofamplifiedfragmentlengthpolymorphismanditsapplicationsinhoneybeeresearch．LIZhi—Yong，ZHAOHui—Yan，GEFeng—Chen，XUEYun．Bo2(1．CollegeofPlantProtection，North

2、westAgrieutureForestryUniversity，Yangling，Shaanxi712100，China；2．1nstiduteofApicuhureofJilinProvince，Jilin132108，China)AbstractAmplifiedfragmentlengthpolymorphism(AFLP)isamolecularfingerprintingtechniquebasedonPCRandRFLP．Ithasbeenusedextensivelyinmanyfields，suchasgeneticdiversity，phy

3、logeneticevolutionandtaxonomy，locationoftargetgenes，constructionofgeneticmapping，marker-assistedbreeding，qualityjudgmentandSOon．Thisreviewsummarizestheprinciples，characteristicsanddevelopmentofAFIJP，andits印plicationsinhoneybeeresearch．Keywordsmoleculargeneticmarker，AFLP．honeybee摘要AF

4、LP分子标记技术是一种建立在PCR技术和RFLP技术基础之上的新的DNA指纹分析技术，现已广泛用于生物遗传多样性、系统进化及分类、基因定位、遗传图谱构建、标记辅助育种和品质鉴定等方面的研究。文章对AFI

5、P分子标记技术的原理、特点、技术发展及其在蜜蜂Ap／sspp．学研究中的应用进行详细论述。关键词分子遗传标记，AFLP，蜜蜂扩增片段长度多态性(amplifiedfragment技术也在蜜蜂学研究中有了初步的应用和发lengthpolymorphism，AFLP)是由荷兰生物学家展，并得到蜜蜂学者们的普遍接受和认可。zabeau和Voc于1993年发明的一种D

6、NA指纹AFLP技术将在未来的蜜蜂学研究中彰显其独技术，并因此而获得了发明专利，受到了专利的特的技术优势。保护。但是，由于AFLP技术较其它分子标1AFLP分子标记技术概述记有着明显的优越性“，因此，世界上很多试1．1基本原理验室都在努力探索AFLP技术在自己的研究工基因组DNA经限制性内切酶充分酶切后，作中的应用，并迅速传播开来。1995年，Zabeau将特定的人工双链接头连在这些片段的两端，形和Vos不得不将其专利解密，并以论文的形式成带接头的特异片段，根据接头序列和酶切位点正式发表出来J。AFLP标记技术的出现，是设计引物，对特异性模板片段进行选择性扩增

7、，DNA指纹技术的重大突破。该技术最初用于扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，最后根据植物的遗传育种、种质资源鉴定等，现已被大量凝胶上DNA指纹的特点进行分析uj。(图1)用于动植物和微生物遗传多样性分析、遗传图谱的构建、医疗诊断、系统发育和分类等研究领域。随着蜜蜂分子生物学研究的不断深入和蜜*Email：drane598@yahoo．eom．elrl收稿日期：2008．03．30，修回日期：2008．05．05蜂基因组全序列的测定完成，AFLP分子标记·314·昆虫知识ChineseBulletinofEntomology200946(2)5'GAATI'C一

8、rI_AA一3’染色技术。荧光扩增片段长度多态性3'CTTAAG—AA兀-5’EeoRI酶丌MseI酶酶切反应(FAFLP)是用荧光染料代替放射性同位素来标TEeoRIAAT昼接头u——一AAIMseI强头记弓l物，用自动化测序仪进行片段的检测，该方连接反应法的出现是AFLP技术发展的一大进步。琼脂1E；EeoRI+A几MseI+C预扩增糖凝胶的EB染色法，主要用于SE．AFLPDNA——■■●A^TTCA—GTTA亡==：：】·__2亓。+CcAAAT亡===择性扩增的检测，该法简单实用。ad,■—一AATrCAAC—TrGTTA亡=1．3．3基于AFLP标

9、记的相关技术发展—■■●TTAAGTT