乳腺癌mcf-7耐放射细胞亚株建立及其抗拒机制的研究

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1、南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博/硕）士学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的

2、研究内容不得以其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授

3、权。作者签名：导师签名：年月日年月日万方数据目录英文缩略词索引…………………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………3英文摘要………………………………………………………………5前言………………………………………………………………………7材料与方法……………………………………………………………9结果……………………………………………………………………19讨论……………………………………………………………………29结论……………………………………………………………………35参考

4、文献………………………………………………………………36综述……………………………………………………………………41攻读硕士学位期间完成、发表论文情况………………………………51致谢……………………………………………………………………52万方数据万方数据英文缩略词索引英文缩写英文全称中文全称FCSFetalcalfserum胎牛血清SFsurvivalfraction细胞存活分数SERsensitizingenhancementradio放射增敏比HIF-1αhypoxiainduciblefactor-1alpha缺氧

5、诱导因子-1αPEplatingefficiency克隆形成率PBSphosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲溶液FCMflowcytometry流式细胞仪rpmrollsperminute每分钟转数PI3Kphosphoinositide3-kinese磷酸肌醇-3激酶AktproteinkinaseB蛋白激酶BPIPropidiumiodide碘化丙啶GYGray戈瑞(焦耳/千克SF2SFat2Gy2Gy照射后存活率SEMScanningelectronmicroscope扫描电子显微镜TEMTra

6、nsmissionelectronmicroscopy透射电子显微镜DoMeanlethaldose平均致死剂量或者失活剂量DqQuasithresholddoe准域剂量ROSreactiveoxygenspecies活性氧族NExtrapolationnumber外推数N值1万方数据2万方数据乳腺癌MCF-7耐放射细胞亚株的建立及其抗拒机制的研究研究生：向晶导师：张树友中文摘要目的：乳腺癌放射治疗的个体差异性较大，常出现放疗抵抗的情况。研究乳腺癌放疗抵抗现象发生的分子生物学机制对于逆转肿瘤细胞的耐放射性、提高放疗效果具

7、有非常重要的意义。本实验探索诱导并建立人乳腺癌耐放射细胞亚株的体外实验方法及其放射抗拒性的初步机制。方法:以人乳腺癌MCF-7细胞株为实验对象，通过体外细胞培养，应用X-射线对人乳腺癌细胞株MCF-7进行梯度递增的诱导照射，得到MCF-7耐放射细胞亚株：MCF-7R。随后观察其细胞形态学、细胞周期与凋亡及放射敏感性的变化，并与乳腺癌亲本株MCF-7比较。扫描电镜和透射电镜对比观察亲本株与耐放射细胞亚株细胞内部的超微结构；流式细胞仪(flowcytometry,FCM)FCM检测其细胞周期与凋亡；集落形成实验检测其放射敏感

8、性，并计算存活分数，单击多靶模型拟合细胞存活曲线。以6GyX-射线分别照射亲本株MCF-7与耐放射细胞亚株MCF-7R，Westernblot法分别检测MCF-7，MCF-7R，MCF-7+6Gy，MCF-7R+6Gy4组的pAkt、HIF-1α蛋白表达，探讨乳腺癌产生放射抗拒性的初步机制。结果：与乳腺癌亲本株MCF