日本血吸虫精氨酸酶基因启动子序列的扩增及序列分析

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1、热带医学杂志"##$年"月第$卷第!期·!·f文章编号g!Db"QCD!K%"##$(#!Q###!Q#F·论著·日本血吸虫精氨酸酶基因启动子序列的扩增及序列分析李孜!，"，余新炳!!，吴忠道!%!&中山大学基础医学院寄生虫学教研室，广州$!##’#；"&广州医学院病原生物学教研室，广州$!#!’"(【摘要】目的获取日本血吸虫%)*(精氨酸酶%+,-(新基因的./+编码序列及其启动子序列0实验验证+,-基因编码序列的完整性。方法以日本血吸虫成虫./+做模板，12,扩增+,-基因编码区的./+序列并测序；根据)*+,-基因已扩增的./+

2、序列设计"条巢式引物，用3454,46+34712,289:;:<;:=;>?95;>，扩增)*+,-基因的启动子序列；对已扩增得到的序列进行3+3+盒的寻找以分析启动子序列的位置，实验验证我们曾获取的)*+,-新基因编码序列的完整性。结果扩增得到长约!###@A+,-基因./+序列0)*+,-基因./+序列内没有内含子，与B./+序列完全一致。对启动子序列扩增后，得到一略大于"$#@A的序列，测序后分析发现其中有CD@A与+,-基因./+序列的$E端重叠。因此0将精氨酸酶基因的./+序列又向前延伸了""!@A，与前面得到的序列拼接后

3、得到一条!F’D@A的总序列，将该序列在/2GH上进行I,J的寻找发现其最长的I,J达!!DF@A，起始密码子在第!$D位，终止密码子在第!C!K位0该起始密码子前C"位为3+3+盒的位置。因此，确定该)*+,-基因全长B./+编码序列长应为!!DF@A。结论成功扩增获得了日本血吸虫精氨酸酶基因编码区的./+序列，其不含有内含子；并扩增得到了该基因的启动子序列，从而获得了)*+,-基因真正的全长B./+序列，为进一步的功能鉴定奠定了基础。【关键词】日本血吸虫；大陆株；精氨酸酶；启动子序列；序列分析中图分类号：,C’CL"F文献标识码：

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