布鲁氏菌sod、l7l12、omp25、omp31蛋白dna疫苗的构建及对小鼠免疫原性的分析

《布鲁氏菌sod、l7l12、omp25、omp31蛋白dna疫苗的构建及对小鼠免疫原性的分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、ClassifiedIndex：Confidential(yes／no)：noDissertationfortheMasterDegreeCode：10224N0．1006341ConstructofaDNAvaccineencodingBrucellaSOD，L7／L12，OMP25，OMP31gene1■●n●●●J●annanalVSlS0IlmmUnogenlCnVinmlceCandidate：QinXiaolinSupervisor：ProfessorLiJichangDegreeCategory：NortheastAgriculturalUni

2、versityCollege：MasterofAgricultureFirstleveldiscipline：VeterinarySciencesSecondleveldiscipline：BasicVeterinarySciencesHarbinChinaJune2013目录摘要⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯．英文摘要一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．II1前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一一⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯．11．1布鲁氏菌简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一1．2布鲁氏菌病流行病学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯一11．3布鲁氏菌病原学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一21．4布鲁氏菌病临床症状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯21．5布鲁氏菌病诊断方法⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一31．5．1细菌学鉴定⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．5．2核酸鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．5．3凝集试验1．5．4ELISA⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一-1．5．5FPA⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一．．．．．．4．．．．41．5

4、．6免疫胶体金技术⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯51．6布鲁氏菌病疫苗研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯-51．6．1RCV,1⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1．6．2S2⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1．6．3M5⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯61．6．4S19⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯--61．6．5灭活疫苗⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-1．6．6突变株疫苗⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．6．7DNA疫苗

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一一1．7布鲁氏菌抗原和毒力相关基因⋯⋯⋯⋯一1．7．1L7／L12蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一1．7．2外膜蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯．8⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．81．7．3毒力基因⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．8研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯·2材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯一2．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一2．1．1菌株、质粒、重组蛋白

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯一112．1．2实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·112．1．3主要试剂及仪器一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一112．1．4主要试剂的配制一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-11i东北农业大学农学硕士学位论文2．2试验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一～⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．2．1真核表达质粒的构建～⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯-122．2．2蛋白表达及纯化⋯⋯～⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯

7、⋯一162．2．32．2．42．2．52．2．6小鼠免疫试验⋯一⋯～⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯·19间接ELISA检测血清抗体水平⋯一⋯⋯～⋯⋯⋯一⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-19小鼠脾脏淋巴细胞的制备一⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一19酶联免疫斑点试验(EUSPOT)⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯一202．2．7流式细胞计数器检测～⋯⋯⋯⋯⋯⋯一～⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-203结果与分析⋯⋯一⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一213．1真核表达质粒构建结果⋯～⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一2l3．1．1SOD基因的扩增及