小鼠小脑皮质发育过程中细胞迁移与血管之间的相互作用

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1、单位代10475码学号104753101470分类号R47硕士学位论文小鼠小脑皮质发育过程中细胞迁移与血管之间的相互作用学科、专业：护理学研究方向：临床护理申请学位类别：医学硕士申请人：陈文静指导教师：邓锦波教授二〇一三年六月TheinteractionbetweencellmigrationandvasculatureinthedevelopingcerebellumofmouseADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfil

2、lmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByChenWenjingSupervisor:ProfDengJinbo.June,2013关于学位论文独创声明和学术诚信承诺本人向河南大学提出硕士学位申请。本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事

3、对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在此本人郑重承诺：所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负。学位申请人（学位论文作者）签名：201年月日关于学位论文著作权使用授权书本人经河南大学审核批准授予硕士学位。作为学位论文的作者，本人完全了解并同意河南大学有关保留、使用学位论文的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文（纸质文本和电子文本）以供公众检索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制

4、手段保存、汇编学位论文（纸质文本和电子文本）。（涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书）学位获得者（学位论文作者）签名：201年月日学位论文指导教师签名：201年月日摘要传统理论认为未成熟的神经元主要是沿着放射状胶质细胞迁移至最终目的地。放射状胶质细胞是脊椎动物中枢神经系统发育过程中普遍存在的一种细胞，该细胞又称伯格曼胶质细胞（Bergmanngliacell），为神经胶质细胞的一种，是胚胎时期的一类干细胞，在小脑皮质发育过程中，可以发育分化为星形胶质细胞和颗粒细胞。因此，放射状胶质细胞在中枢神经系统中占据重要的角色，不仅

5、可以引导神经细胞从室区向有丝分裂后区域迁移，同时又为新生神经细胞的迁移提供路径和支架。但是最近越来越多的研究证明，中枢神经系统内的血管也参与了神经细胞的迁移。血管的主要功能是运输一些气体、营养物质、激素和循环细胞。神经系统内的血管有着广泛的功能，比如胚胎早期的“血管龛室”可以为神经发生，神经细胞迁移以及轴突延伸等提供一个“微环境”。目前，国内外对小脑皮质的发育主要集中于细胞形态和神经递质方面，但是关于小脑皮质发育过程中，血管与细胞迁移之间的关系了解并不十分清楚。另外，有研究表明，-/-小鼠神经鞘磷脂合成酶2基因敲除（sphin

6、gomyelinsynthase2knockout,SMS2）会造成体内神经酰胺的堆积，神经酰胺的堆积是否会影响小脑外颗粒层细胞的增殖，目前缺乏全面的报道。所以本研究将进一步为我们阐明中枢神经系统的发育及发育相关的疾病提供重要的理论依据，同时也有助于临床上一些视网膜神经组织与血液疾病的治疗。目的观察小鼠小脑皮质片层化的组织发生过程和放射状胶质细胞的分化；探讨血管和放射状胶质细胞以及细胞迁移之间的关系，同时分析神经酰胺堆积对小脑外颗粒层神经细胞增殖的影响。方法本课题应用免疫荧光，BrdU抗体检测技术配合墨汁灌注等技术对胚胎和出生

7、后小鼠小脑皮质进行形态学观察，对C57BL∕6J野生小鼠和神经鞘磷脂合成酶2基因敲除小鼠小脑皮质外颗粒层BrdU阳性细胞数和小脑皮质内血管体密度进行比较和测量。结果①小脑片层化的形成：小鼠小脑的发育始于第四脑室侧壁的菱唇，E10时，菱唇主要由神经上皮组成，至出生当日，小脑皮质形成了外颗粒层、分子层、浦肯野细胞层和颗粒层。随着年龄的增长，发育至P3时，浦肯野细胞层排列紊乱，大约3-6层，此时，外颗粒层的细胞大量的迁移至内颗粒层。P10时，外颗粒层的细胞已经基本全部迁移至内颗粒层。大约在P22左右，小脑片层化完成，形成了三层典型结

8、构：分子层、I浦肯野细胞层和颗粒层。②细胞的迁移：大约在E15时，浦肯野细胞开始迁移，P7时，完成了它的迁移，排列成整齐的一层；同时，外颗粒层的细胞在P0时开始向内颗粒层迁移，发育至P10时，迁移基本停止。③放射状胶质细胞的分化：E15时，小脑内出现大量的放射状胶质细胞，随着