地塞米松干预宫内感染致新生鼠脑白质损伤tnf-a及nogo-a的表达变化

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：舱冬勺篙签字日期：扣侈年够月铆日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大

2、学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名(手写)：柏≮1泰导师签名(手写)：书硼，】签字日期：爿，年哆月引日签字日期：洳侈年g月参／日摘要目的：通过研究推测宫内感染致新生鼠脑白质损伤与肿瘤坏死因子．a(TumorNecrosisFacto

3、r．a，TNF．a)及神经轴突生长抑制因子．A(Neuriteoutgrowthinhibitor-A,Nogo．A)有关；地塞米松(Dexamethasone，Dex)可能通过减少脑组织TNF．a、Nogo．A表达，对宫内感染致新生鼠脑白质损伤有保护作用。方法：1．建立动物模型及实验分组：将36只Sprague．Dawley(SD)雌性大鼠，12只SD雄性大鼠适应环境1周后，以3：1比例合笼，每日清晨观察母鼠阴道，以发现阴道阴栓之日记为受孕第1日，未发现阴栓的雌性大鼠做阴道拭子的图片，镜下的发现精子即记为受孕。选取30只确定受孕的SD雌鼠随机分为，

4、生理盐水(Normalsaline,NS)组，LPS组，Dex组，每组10只。NS组在SD母鼠孕第15、16天腹腔内注射生理盐水0．35mg／kg．d，连续2天，LPS组在SD母鼠孕第15、16天腹腔内注射LPS，0．35mg／kg．d，连续2天。Dex组在SD母鼠孕第15、16天腹腔注射LPS，0．35mg／kg．d，注射LPS后1小时，相同方法注射Dex，0．5mg／kg．d，连续2天。2．采集标本：除去孕22天前，娩出的早产鼠，足月新生鼠娩出后，分别于生后4个时间点(6h，12h，24h，48h)断头处死，每个时间点8只，断头处死后迅速取脑组织

5、于10o／60福尔马林溶液中固定12h，然后进行常规脱水、石蜡包埋，应用苏木素．伊红(hematoxylineosin，HE)染色观察各组各时间点新生鼠脑组织病理形态及组织结构的变化。在新生鼠娩出后，夹起脱落的胎盘，蒸馏水冲洗后固定于10％福尔马林溶液，12h后进行常规脱水、石蜡包埋。随机选取NS组，LPS组及Dex组的母鼠，每组2只，断头处死后取其子宫，10％福尔马林溶液中固定12小时后，然后进行常规脱水、石蜡包埋，HE染色观察各组母鼠子宫、胎盘病理形态及组织结构的变化，及镜下中性粒细胞的数量。3．观察指标：采用S．P(Streptavidin．P

6、erosidase，S．P)法免疫组化染色检测各组新生鼠生后6h、12h、24h、48h，脑组织TNF．a及Nogo．A的表达。结果：1．子宫、胎盘HE染色病理学变化：各组子宫壁HE染色镜下均可见代表已孕的滋养细胞。NS组：子宫壁、胎盘轮廓清晰，细胞排列整齐，镜下偶见中性粒细胞；LPS组：子宫壁、胎盘充血水肿，轮廓不清晰，血管壁增厚，管摘要腔不规则，可见大量反应性的中性粒细胞浸润；Dex组：子宫壁、胎盘轮廓尚清晰，可见少量反应性中性粒细胞。2．脑组织HE染色病理学变化：NS组：脑组织结构未见明显改变，轮廓清晰；神经细胞排列整齐，细胞膜完整，细胞核染色

7、均匀，神经细胞间质无异常，各时间点变化无明显差异。LPS组：脑组织水肿、疏松、稀化；神经细胞膜不完整可见凹陷改变，细胞核染色不均匀，细胞核基质破坏可见核碎裂及固缩，神经细胞间质水肿。Dex组：脑组织可见轻度水肿，未见组织明显稀疏，染色尚清晰；神经细胞胞膜较完整，偶可见缺损，细胞核可见少许碎裂，但无核固缩变化，神经细胞间质部分可见轻度水肿，各时间变化现相近，变化无明显差异。3．TNF．a表达：NS组组内各个时间点TNF．a表达的比较，无统计学意义(P>O．05)。LPS组新生鼠脑组织TNF．a表达生后6h迅速上升，12h表达达到高峰，高峰后维持在较高水

8、平，组内各时间点比较无统计学意义(P>0．05)。Dex组新生鼠脑组织TNF．a表达相同时间点高于NS组，差