不同基因型弓形虫成囊株感染大鼠腹腔巨噬细胞诱导arg-1合成机制的研究

不同基因型弓形虫成囊株感染大鼠腹腔巨噬细胞诱导arg-1合成机制的研究

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1、分类号:密级:UDC:编号:学位论文不同基因型弓形虫成囊株感染大鼠腹腔巨噬细胞诱导Arg-1合成机制的研究TheMechanismsofArginase-1SynthesisinRatPeritonealMacrophagesInfectedwithCyst-formingStrainsofT.gondiiwithDifferentGenetypes张倩指导教师姓名沈继龙教授安徽医科大学病原生物学教研室申请学位级别硕士专业名称临床检验诊断学提交论文日期2013-03-18论文答辩日期2013-05学位授予单位和日期安徽医科大学2013年6月答辩委员会主席章尧评阅人王芳等2

2、013年5月安徽医科大学ANHUIMEDICALUNIVERSITY硕士学位论文不同基因型弓形虫成囊株感染大鼠腹腔巨噬细胞诱导Arg-1合成机制的研究TheMechanismsofArginase-1SynthesisinRatPeritonealMacrophagesInfectedwithCyst-formingStrainsofT.gondiiwithDifferentGenetypes作者姓名:张倩指导教师:沈继龙教授学科专业:临床检验诊断学申请学位级别:硕士论文工作时间:2011年5月至2013年2月2013年5月学位论文独创性声明本人所呈交的论文是我个人在导师

3、指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作者签名:日期:学位论文使用授权声明本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定:学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版,有权允许论文进入学校图书馆被查阅,有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索,有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。愿意将本人的学位论文提交《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据

4、库》和《中国学位论文全文数据库》中全文发表,并可以以电子、网络及其他数字媒体形式公开出版,并同意编入CNKI《中国知识资源总库》,在《中国博硕士学位论文评价数据库》中使用和在互联网上传播。保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名:导师签名:日期:日期:目录英文缩略词汇表…………………………………………………………...1中文摘要…………………………………………………………………...2英文摘要…………………………………………………………………...41前言……………………………………………………………...…......62材料与方法……………………………………

5、……………………...112.1实验材料…………………………………………………............112.1.1实验动物…………………………………………….........112.1.2实验虫株……………………………….………………...112.1.3主要试剂…………………………….…………………...112.1.4部分试剂的配置……………………………………….....122.1.5实验所用仪器与设备………………………………….....122.2实验方法………………………………………………………....132.2.1弓形虫传代和纯化……………………………………....

6、.132.2.2大鼠腹腔巨噬细胞的抽取和体外培养………………….142.2.3细胞上清液中尿素浓度的测定…………………….........142.2.4细胞上清液中NO浓度的测定………………….…..........162.2.5real-timePCR……………………………………….....182.2.6WesternBlotting……………………………..…………222.2.7siRNA…………………….………………………….….....242.2.8吉姆萨染色……………………………………………….252.2.9统计学方法...……………………………………………..

7、253结果…………………………………………………………………...263.1弓形虫在大鼠腹腔巨噬细胞内的形态……………………263.2大鼠腹腔巨噬细胞体外感染PRU株和TgCtwh6株后细胞内Arg-1的表达……………………………………………….273.3RNAi沉默效率的检测…………………….,……………...293.4siRNA干扰巨噬细胞后感染PRU株和TgCtwh6株细胞内Arg-1的表达……………………………………………......313.5地塞米松抑制大鼠巨噬细胞后NO和Arg-1的表达………………………………..

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