二甲基苯蒽诱导的小鼠乳腺癌模型研究

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1、单位代码10475学号104754110462分类号R965硕士学位论文二甲基苯蒽诱导的小鼠乳腺癌模型研究Thestudyofbreastcancermodelinducedby7,12-dimethylbenz(a)anthraceneinmice学科、专业：中药学研究方向：肿瘤药理与中药药理申请学位类别：医学硕士申请人：张亚平指导教师：杜钢军教授二〇一三年五月THESTUDYOFBREASTCANCERMODELINDUCEDBY7,12-DIMETHYLBENZ(A)ANTHRACENEINMICEADissertationS

2、ubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofEducationByZhangYapingSupervisor:Prof.DuGangjunMay,2013ByAbbreviation英文缩写英文全称中文全称DMBA7,12-dimethylbenz(a)anthracene7，12-二甲基苯蒽MNUN-methyle-N-nitrosoureaN-甲基N-亚硝基脲ECMEx

3、tracellularmatrixc细胞外基质BMBasementmembrane基底膜MMPsMatrixmetalloproteinases基质金属蛋白酶NTsNeurotrophins神经营养因子ColⅠTypeⅠcollagenⅠ型胶原ColⅡTypeⅡcollagenⅡ型胶原ColⅢTypeⅢcollagenⅢ型胶原LNLaminin层粘连蛋白MMP-9MatrixMetalloproteinase-9基质金属蛋白酶-9TIMP-1Tissueinhibitorsofmetalloproteinase-1组织基质金属蛋白酶

4、抑制剂-1NGFNervegrowthfactor神经生长因子BDNFBrain-derivedneurotrophicfactor脑源性神经营养因子TrkATropomyosin-relatedkinaseA酪氨酸激酶受体ATrkBTropomyosin-relatedkinaseB酪氨酸激酶受体BTGF-β1Transforminggrowthfactor-β1转化生长因子-β1bFGFBasic-fibroblastgrowthfactor碱性成纤维细胞生长因子PAFPlateletactivatingfactor血小板活化因

5、子ELISAEnzyme-linkedimmunosorbentassay酶联免疫分析HEHematoxylin-eosinstaining苏木精-伊红染色法BrdU5-Bromo-2-deoxyUridine5-溴脱氧尿嘧啶核苷BSAAlbuminfrombovineserum牛血清白蛋白AcrAcrylamide丙烯酰胺BisBis-acrylamide甲叉双丙烯酰胺GlyGlycine甘氨酸APAmmoniumpersulphate过硫酸铵2-ME2-Mercaptoethanol2-巯基乙醇SDSSodiumdodecyls

6、ulfate十二烷基硫酸钠MTT3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphe3-（4，5-二甲基噻唑-2）nyltetrazoliumbromide-2，5-二苯基四氮唑溴盐摘要乳腺癌是目前公认的女性第二大杀手，乳腺癌动物模型对于乳腺癌病因研究和治疗、药物筛选与评价均具有重要的意义。二甲基苯蒽（DMBA）诱导大鼠乳腺癌模型较为成熟，但在小鼠体内能否成功建立乳腺癌模型研究较少。本文目的是探索DMBA能否在小鼠体内成功诱导乳腺癌，为研究乳腺癌发病机制和评价中药治疗乳腺癌的特色优势提供良好的动物模型。本研究

7、采用C57BL/6小鼠灌胃二甲基苯蒽（DMBA）橄榄油溶液50mg/kg，每周1次，连续5周的造模方式诱导小鼠乳腺癌模型。通过观察实验期间小鼠乳腺肿瘤潜伏期、发生率、生存期、外观、体温、自主活动、外耳微循环变化及血液流变学指标，评价乳腺癌小鼠模型的中医学体征变化；通过组织切片HE染色法、SABC免疫组化染色法，观察小鼠乳腺癌组织不同时期形态学变化及TGF-β1含量表达，同时与临床病理切片相比较，评价小鼠乳腺癌生物学特性与临床乳腺癌的相似性；通过给予以附子为主药的温热处方和以蒲公英为主药的寒凉处方进行药物佐证，检测能量代谢指标（红细胞

8、膜++2+2+Na-K-ATP酶、Ca-Mg-ATP酶）活性、血清雌激素（雌二醇、孕酮）水平、血清细胞因子及其受体（NGF、TrkA、BDNF、TrkB、bFGF、TGF-β1、PAF）和细胞外基质（TIMP-1、MMP-9、LN、C