uvb辐射对人成纤维细胞tet2基因表达的影响

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1、中图分类号UDCR71610学校代码密级硕士学位论文10533UVB辐射对人成纤维细胞TET2基因表达的影响TheInfluenceofUVBradiationontheTET2geneexpressioninculturedhumanskinfibroblast作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：谭姗姗临床医学皮肤性病学湘雅三医院陈静论文答辩日期盈皇：苎：11>答辩委员会主席中南大学二O一三年五月本课题由以下基金资助(项目负责人：黄进华)湖南省科技厅科技计划项目(2010FJ4019，2011FJ6044)特此致谢!原创性声明I

2、IJIIIIllllllllllllfY2422194本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：日期：砸年』月掣日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论

3、文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。储虢率盟聊签名埤吼醴年且掣日UVB辐射对人成纤维细胞TET2基因表达的影响摘要：目的：1．观察UVB干预对体外培养人成纤维细胞增殖活力的影响。2．观察UBV干预对体外培养人成纤维细胞TET2基因表达的影响。方法：1．取体外培养的原代人成纤维细胞，用不同剂量UVB照射成纤维细胞。2．亚毒性剂量UVB累积五次照射成纤维细胞后，用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测照射组及对照组细胞的增殖活力

4、。3．用不同累积剂量UVB照射干预各组成纤维细胞后，用realtime．PCR法检测各组成纤维细胞的羟甲基化相关基因TET2的表达情况。4．用不同累积剂量UVB照射干预各组成纤维细胞后，用Western—Blot法检测TET2蛋白的含量。结果：1．用每日10mJ／cm2，累积照射剂量50mJ／cm2的UVB辐射干预体外培养的人成纤维细胞后，取经干预的细胞接种培养，同时接种未经干预的细胞作为对照组，把细胞爬壁时间设为Oh时间点，在Oh、24h、48h、72h及96h时间点用MTT法检测细胞增殖活性，与对照组相比，在同一时间点经干预的细胞吸光度明显小于对

5、照组，增殖活力低，在Oh时间点无统计学意义(矿O．05)，在24h、48h、72h、96h时间点差别均具有统计学意义(p

6、意义(胯O．05)，UVB辐射量为10mJ／cm2组的人成纤维细胞中TET2mRNA与空白对照组相比无统计学差异(p>O．05)。3．根据RT．PCR的检测结果，选取具有统计学意义的组别进行TET2蛋白含量的检测，用Werstem．Blot法检测对照组及UVB累积辐射量为20mJ／cm2、30mJ／cm2、40mJ／cm2、50mJ／cm2的处理组，随累积照射量的增加，TET2蛋白水平先呈上升趋势，在20mJ／cm2组最大，随后逐渐下降，UVB累积辐射量为20mJ／cm2、30mJ／cm2的处理组与对照组相比TET2蛋白表达的水平增加有统计学意义(p

7、0．05)。结论：1．用亚毒性剂量UVB每次10mJ／cm2，共五次干预体外培养的人成纤维细胞后，细胞的增殖活力与对照组相比明显降低，细胞呈现老化状态。2．用适宜剂量UVB干预体外培养的人成纤维细胞后，TET2表达增加，UVB照射可诱导TET2基因的表达，去甲基化作用为光老化发生的机制之一。图11幅，表3个，参考文献37篇。关键词：UVB

8、TET21光老化；成纤维细胞分类号：R71TheInfluenceofUVBradiati

9、onontheTET2geneexpressioninculturedhumanskinfibroblast