uvb辐射对人成纤维细胞5-mc和5-hmc水平的影响

《uvb辐射对人成纤维细胞5-mc和5-hmc水平的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中图分类号R751VDC610硕士学位论文学校代码10533密级公开UVB辐射对人成纤维细胞5-mC和5-hmC水平的影响TheeffectofU1travioletBradiationonthe5-methylcytosineand5-hydroxymethylcytosinelevelsofhumanfibroblast!lauantlblasts作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：论文答辩日期9．oI与。5．z4孔伟临床医学皮肤病与性病学湘雅三医院黄进华教授答辩委员会主席中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所

2、呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国

3、科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：坐!堑导师签名日期：趁!皇年』月丛日UVB辐射对人成纤维细胞5-mC和5-hmC水平的影响摘要：目的：1．探讨UVB辐射对体外培养人成纤维细胞增殖能力的影响。2．探讨UVB辐射对体外培养人成纤维细胞5．甲基胞嘧啶(5-mC)和5．羟甲基胞嘧啶(5-hmC)水平的影响。方法：1．常规体外培养原代人成纤维细胞，将细胞分为两组：空白对照组和UVB处理组(累积剂量50mJ／cm2UVB辐射)；2．四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测成纤维细胞增殖情

4、况；3．HE染色观察细胞形态学变化；4．免疫组织化学ABC法检测成纤维细胞5-mC和5-hmC表达水平；5．免疫荧光法检测成纤维细胞5-mC和5-hmC表达水平：结果：1．HE染色观察细胞形态变化：空白对照组的成纤维细胞排列规则，成漩涡状或栅栏状，细胞形态呈长梭形，胞质丰满，胞膜完整，可见核分裂象：UVB处理组的成纤维细胞与空白对照组相比，细胞数目明显减少且排列不规则，细胞变得宽大扁平，多数呈现多角形，胞质疏松透明，边界变得不清楚，胞核内颗粒物增多，核分裂象少见。2．MTT检测结果为UⅦ处理组细胞的吸光度值随时间(第24、48、72、96、

5、120小时5个时间点)升高并不显著，而空白对照组细胞的吸光度值则明显升高；且空白对照组在72h、96h、120h各时间点吸光度值均明显高于UVB照射组(P<0．05)。3．免疫组织化学ABC法检测空白对照组5-hmC表达明显低于处理组，而5-mC表达明显高于处理组(P<0．05)。4．免疫荧光法检测结果同免疫组织化学ABC法：空白对照组5-hmC表达水平明显低于处理组，而5-mC表达水平明显高于处理组(P<0．05)。结论：1．亚毒性剂量(50mJ／cm2)的UVB辐射能明显抑制体外培养人成纤维细胞细胞的增殖能力。2．UVB辐射能下调体外培

6、养人成纤维细胞内5-mC的表达水平，同时上调5-hmC的表达水平。图11幅，表4个，参考文献41篇关键词：中波紫外线；DNA甲基化；5．甲基胞嘧啶；5一羟甲基胞嘧啶；人成纤维细胞分类号：R75lTheeffectofUltravioletBradiationonthe5一methylcytosineand5-hydroxymethylcytosinelevelofhumanfibroblastsAbstractObjectives：1。ObservetheeffectofUltravioletBradiationontheprolifera

7、tionabilityofculturedhumanfibroblasts．2．ObservetheeffectofUltravioletBradiationonthe5-methylcytosine(5一mE)and5-hydroxymethylcytosine(5-hmC)levelofculturedhumanfibroblasts．Methods：1．Divideprimaryculturedfibroblastsintotwogroups：controlgroupandtreatmentgroup(accumulativedosa

8、geof50mJ／cm。UVBirradiation)；2．Detectthefibroblastsproliferationactivi锣byMTTassay；3．Observ