一氧化氮在ala光动力诱导人皮肤鳞癌a431细胞凋亡中的作用研究

一氧化氮在ala光动力诱导人皮肤鳞癌a431细胞凋亡中的作用研究

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1、一氧化氮在ALA光动力诱导人皮肤鳞癌A431细胞凋亡中的作用研究StudyontheroleofNitricoxidein5..aminolevulinicacidphotodynamictherapy--inducedapoptosisinhumanskinsquamouscellcarcinomaA431cells硕士研究生:院系:专业:研究方向导师张云凤扬州大学医学院皮肤病与性病学光动力医学与皮肤癌王秀丽教授扬州大学2013年5月缩略词⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.9日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..譬第一部分研究ALA.PDT诱导人皮肤鳞癌A431细胞凋亡中的NO释放情况及iNOS表达情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..14材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.14结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.22讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..25第二部分初步探索NO在ALA.PDT诱导人皮肤鳞癌A431细胞凋亡中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.27引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.27材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.32讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.38参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..39附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..45致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.54扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..55张云凤一氧化氮在ALA光动力诱导人皮肤鳞癌A431细胞凋亡中的作用研究简称PDT5.ALANOmSCCBCCNMSCsAPOFBS缩略词

5、表Abbreviation英文名称中文名称Photodynamictherapy光动力疗法5-aminolevulinicacidNitricoxideUltravioletRadiationSquamouscellcarcinomaBasalcellcarcinoma5.氨基酮戊酸一氧化氮紫外线照射鳞状细胞癌基底细胞癌Non—melanomaskincancers非黑素性皮肤癌ApoptosisFetalbovineserum凋亡胎牛血清NCmembraneNitrocellulosefiltermembrane硝酸纤维素膜TBSPBSiNOSSD

6、A.PAGEROSCaspaseTris.HClbufferedsalineTris.HCl缓冲盐溶液Phosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲液Induciblenitricoxidesynthase诱导型一氧化氮合酶抑制剂Sodiumdodecylsulfatepolyacrylamide十二烷基硫酸钠.聚丙烯gelelectrophoresis酰胺凝胶电泳Reactiveoxygenspecies活性氧分子Cysteineasparticacid-specificproteases半胱氨酸天冬酸特异性蛋白酶扬州大学硕士学位论文2

7、一氧化氮在ALA光动力诱导人皮肤鳞癌A431细胞凋亡中的作用研究中文摘要目的:探索5.氨基酮戊酸光动力(5一aminolevulinicacidphotodynamictherapy,ALA.PDT)诱导人皮肤鳞癌A431细胞凋亡过程中NO的作用,以深入认识ALA.PDT治疗鳞状细胞癌的分子机制。方法:1、培养人皮肤鳞癌A431细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况。2、在最佳ALA孵育浓度lmM,最佳孵育时间点5h时,采用30mW/cm2功率密度的630nm红光作为光源,给予不同光剂量(2J/cm2,4J/cm2)对A431细胞进行ALA.PDT处理,

8、采用磷脂结合蛋白V(AnnexinV)/碘化丙锭(PI)双染法通过流式细胞术检测ALA.PDT后不同时间点(

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