低氧诱导自噬促进上皮性卵巢癌转移的机制研究

《低氧诱导自噬促进上皮性卵巢癌转移的机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、上海交通大学医学院2010级博士学位论文上海交通大学医学院博士学位论文低氧诱导自噬促进上皮性卵巢癌转移的机制研究TheRoleofHypoxia-InducedAutophagyintheMetastasisofEpithelialOvarianCancer研究生：唐中园学号：0107219156导师：李卫平教授指导小组成员：狄文教授邱丽华副教授季芳副教授刘伟副教授学科(专业)：妇产科学答辩日期:2013年4月万方数据上海交通大学医学院2010级博士学位论文上海交通大学医学院博士学位论文低氧诱导自噬促进上皮性卵巢癌转移的机制研

2、究TheRoleofHypoxia-InducedAutophagyintheMetastasisofEpithelialOvarianCancer研究生：唐中园学号：0107219156导师：李卫平教授学科(专业)：妇产科学答辩日期:2013年4月研究方向：卵巢癌发病机制研究申请学位级别：博士培养单位：上海交通大学医学院附属仁济医院资助基金项目：2011年度国家自然科学基金（项目批准号:81101972）万方数据上海交通大学医学院2010级博士学位论文上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师

3、的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日万方数据上海交通大学医学院2010级博士学位论文上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内

4、容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日万方数据上海交通大学医学院2010级博士学位论文低氧诱导自噬促进上皮性卵巢癌转移的机制研究摘要研究目的：上皮性卵巢癌死亡率居妇科恶性肿瘤之首。大多数患者就诊时已处于晚期阶段，虽然手术联合化疗是治疗晚期卵巢癌的标准，但患者极易复发和转移，预后较差。因此，深入探讨上皮性卵巢癌发生侵袭转移的相关机制，并寻求新的治疗策

5、略以改善晚期卵巢癌的治疗效果和生存率是亟待解决的关键问题。近年来，越来越多的研究表明自噬在卵巢癌发病机制及治疗中起着多重作用，但自噬究竟是促进还是防止肿瘤的形成、增殖和转移一直有争议。另外，在多种肿瘤中也发现缺氧和HIF-1α可在不同的水平调节自噬，与肿瘤发生进展、预后和转移密切相关。综上，本论文研究在缺氧环境下上皮性卵巢癌中自噬发生的情况及HIF-1α对其的调控，同时在细胞及动物水平探讨缺氧-自噬在卵巢癌侵袭转移中的重要作用，并探讨可能涉及的分子机制，为卵巢癌的靶向治疗和新药研发提供理论依据和新的治疗靶点。研究方法：1、在常

6、氧和缺氧培养体系下，在上皮性卵巢癌细胞株（HO8910PM和HO8910）中，通过免疫印迹法和免疫荧光技术检测自噬效应分子Beclin1、LC3，以及HIF-1α的蛋白水平和核移位，探讨缺氧诱导的自噬发生情况。2、分别在常氧和缺氧培养体系下，在上皮性卵巢癌细胞株，转染HIF-1α质粒或siRNA-HIF-1α，或用药物NSC606985干预HIF-1α，进一步验证缺氧环境下HIF-1α万方数据上海交通大学医学院2010级博士学位论文对自噬的调控。3、应用自噬抑制剂3-MA或基因沉默技术抑制缺氧诱导的自噬，通过粘附实验、Tran

7、swell迁移实验或Matrigel侵袭实验，分别观察上皮性卵巢癌细胞株粘附、迁移和侵袭能力的改变，并考察RhoA信号途径及F-actin装配情况的差异，探讨低氧诱导的自噬在卵巢癌侵袭转移中的作用，以及可能涉及的细胞骨架调控机制。4、通过建立裸鼠HO8910PM原位移植瘤模型，并给予自噬抑制剂3-MA处理，比较原发瘤瘤重及多脏器转移情况，同时分析其肿瘤原发灶及转移灶中自噬发生的情况，在动物水平初步探讨自噬与卵巢癌转移的关系，并评估3-MA的抗癌效果，为其潜在的临床应用价值提供数据支持。研究结果：1、低氧微环境能够激活HIF-1

8、α，并诱导上皮性卵巢癌细胞发生自噬。新型喜树碱类药物NSC606985在纳摩尔浓度即可发挥对HIF-1α的调控作用，也因而实现对自噬的调控，但药物效应有细胞类型特异性。2、自噬抑制剂或基因沉默技术阻断低氧诱导的自噬可抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力。低氧诱导自噬促进上皮性卵巢癌