华蟾素联合他莫昔芬(tam)对卵巢癌a2780细胞生长影响的实验研究

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1、分类号R71密级公开UDC硕士学位论文华蟾素联合他莫昔芬（TAM）对卵巢癌A2780细胞生长影响的实验研究学位申请人：王成双学科专业：妇产科学指导教师：佐满珍主任医师陈涛教授二○一三年五月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineExperimentalStudiesofBufoninandTamoxifeninHumanOvarianCarcinomaCellLineA2780GraduateStudent:WangCh

2、engshuangMajor:ObstetricsandGynecologySupervisor:Prof.ZuoManzhenChenTaoChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMay,2013三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后

3、果由本人承担。学位论文作者签名：日期：三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位，并事先征得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。学位论文作者签名：日期：I三峡大学硕士学位论文内容摘要目的：研究华蟾素及他

4、莫昔芬单独、联合用药对卵巢癌A2780细胞生长的影响，以期能为临床卵巢癌患者提供新的辅助治疗方案，并探讨二者是否具有协同效应及其可能的作用机制。方法：体外培养卵巢癌A2780细胞，将细胞均随机分为8组：华蟾素组(1组)；他莫昔芬组(2组)；顺铂组(3组)；华蟾素联合他莫昔芬组(4组)；华蟾素联合顺铂组(5组)；他莫昔芬联合顺铂组(6组)；华蟾素及他莫昔芬联合顺铂组(7组)；对照组(8组)；以顺铂为阳性对照，用华蟾素注射液、他莫昔芬单独或联合作用于相应各组细胞，采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）检测IC50和细胞生长抑制率，采用流式细胞术检测细胞

5、周期，Hoechst染色检测细胞凋亡，细胞免疫荧光技术检测细胞雌激素受体的表达，RT-PCR检测Bax、Bcl-2及芳香化酶mRNA表达。结果：(1)药物对细胞表现出抑制作用，其IC50分别为华蟾素：0.56mg/ml；他莫昔芬：12.69ug/ml；顺铂：2.80ug/ml。药物的对癌细胞的生长抑制率随时间延长而增强，联合用药效果优于单独用药，与化疗药物合用表现出化疗增敏作用。(2)华蟾素和他莫昔芬对卵巢癌A2780细胞表现出凋亡作用(P＜0.01)。(3)华蟾素和他莫昔芬能上调促凋亡基因Bax的基因表达(P＜0.01)，下调抑凋亡基因Bcl-2的基因表

6、达(P＜0.01)；华蟾素能促进芳香化酶(Aromatase)的基因表达(P＜0.01)，他莫昔芬能抑制芳香化酶(Aromatase)的基因表达(P＜0.05)。(4)华蟾素使人卵巢癌A2780细胞周期停滞于S期(P＜0.01)，他莫昔芬可使其停滞于G0/G1期(P＜0.01)。结论：华蟾素及他莫昔芬对卵巢癌A2780细胞的生长表现出抑制作用，二者对化疗药物具有增敏作用。华蟾素和他莫昔芬抑制细胞生长的机制可能与其促进细胞凋亡有关。关键词：华蟾素他莫昔芬卵巢癌辅助化疗II三峡大学硕士学位论文AbstractObjectiveTostudytheeffects

7、ofusingcinobufaginandtamoxifenseparatelyandandfederativelyongrowthofovariancancerA2780cells,Inordertoprovidenewauxiliarytherapyforclinicalovariancancerpatients,anddiscusswhetherthetwohaveasynergisticeffectanditspossiblemechanism.MethodsTheovariancancerA2780cellswerecultivatedinvit

8、ro,andrandomlydividedintoeightgro