刺参(apostichopus japonicus selenka)养殖池塘生态系统微生物结构与功能研究

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1、谨以此论文献给我最敬爱的导师、亲人和朋友-------闫法军刺参（ApostichopusjaponicusSelenka）养殖池塘生态系统微生物结构与功能研究学位论文完成日期：指导教师签字：答辩委员会成员签字：独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日------------

2、---------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意以下事项：1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。

3、（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日刺参（ApostichopusjaponicusSelenka）养殖池塘生态系统微生物结构与功能研究摘要刺参（ApostichopusjaponicusSelenka）养殖业是我国特色海水养殖产业之一，主要分布在辽宁和山东沿海。刺参养殖业发展迅速，2010年全国刺参养殖面积已达到16万公顷，产量达13万吨，产值接近200亿元。然而，相对于其迅速发展的规模，与刺参养殖技术相关的基础研究还比较滞后。目前，在刺参的养殖生产实践中，微生物修复技术已越来越受到人们的重视。微生物修复作

4、用的强弱与养殖环境中微生物群落的生态结构与功能特征密切相关，反之，微生物群落的生态结构与功能特征能够反映环境的健康状况。因此，了解刺参养殖池塘环境微生物群落的结构和功能特征具有十分重要的意义。本研究采用PCR-DGGE指纹图谱技术和BIOLOG-ECO微平板培养法，研究了刺参养殖池塘水体、底泥和附着基沉积物中的微生物群落结构和功能以及它们与环境因子间的相互关系；另外，对几株前期分离筛选自刺参池塘环境中的潜在益生菌进行了饲喂刺参实验以探讨它们对刺参生长和免疫提高方面的功能作用。本研究旨在为刺参池塘环境微生态调控模式的建立提供基础资料。主要研究结果如下：1刺参池塘环境微生物

5、群落结构的季节变化利用PCR-DGGE技术和冗余分析（RDA）方法研究了刺参（Apostichopusjaponicus）养殖池塘环境（水体、底泥、附着基）细菌微生物群落结构的季节变化及其与环境因子间的关系。结果表明：（1）刺参养殖水体中的优势菌群归属于-Proteobacteria、γ-Proteobacteria、Bacteroidetes、Cyanobacteria及一部分未知不可培养菌群（unculturedbacteria）。变形菌纲细菌（Proteobacteria）为各季节水体中的绝对优势菌群，其相对丰度在49.3-72.1%之间，其中以-Proteo

6、bacteria含量最高；Cyanobacteria仅出现在秋季水体中，其丰度颇低。显著性方差分析结果发现，γ-Proteobacteria菌群丰度具有显著的季节变化。比较而言，水体细菌群落结构以秋季最复杂，冬季最简单。（2）底泥中的优势菌群归属于-Proteobacteria、γ-Proteobacteria、δ-Proteobacteria、Bacteroidetes、Chloroflex、Actinobacteria和Sphingobacteria。变形菌纲细菌为各季节底泥中的绝对优势菌群，其相对丰度在49.6-55.1%之间，其中又以γ-Proteobacte

7、ria含量占绝对优势；Chloroflex菌群仅出现在春、秋季节样品中，且春季丰度较高；Actinobacteria菌群在春季样品中未检测到。显著性方差分析发现，Actinobacteria菌群丰度在夏季显著高于冬季。比较而言，底泥细菌群落结构以秋季最复杂。（3）附着基中的优势菌群归属于-Proteobacteria、γ-Proteobacteria、δ-Proteobacteria、ε-Proteobacteria、Flavobacteria、Bacteroidetes、Cyanobacteria、Actinobacteria及unc