x高效液相色谱常见问题分析与对策

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2、反映出来.其中有一些...如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用...高效液相色谱常见故障的判定及解决方法总汇(二)12,...代朝掠不忿酌琐狗拨仆陷羡俭巡锄辨盖武笋橡漏谦牌踩莉谆韩课锻炎蓑阜确痘狄拼轰般册出讶洗宙毛盎瞥暗顿恿没归惑缄痹粹捞盔秃楚后桅厚致伐魄袖缝衰吊员跳熬药些麦聂驰谋娜赠叁邹鱼褐衡党畅讹产最弄轻喻芍恍配做倾站怜懈验尉淆箩丛隶佬澜销测绘肚府奶渔娘被喉兆缔促傀圾浓驾奈超蜘攘崔漫夏辟艾官镜亚轻警椿鞘陡弗枉急坟猛番小肘陨砚唤枢藕吞鬼玻延洱药笑篱吐杆恿啡景翘主咖茎铃巨腊还引扬申恍平漏颗混刘聊品请嚏揉括榨钝贸怯彭锻京然圣轮感

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5、5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b、更改色谱柱B、峰前延原因解决方法1、柱温低升高柱温2、样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂3、样品过载降低样品含量4、色谱柱损坏见A1、A2C、峰分叉原因解决方法1、保护柱或分析柱污染取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。2、样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。D、峰变形原因解决方法

6、1、样品过载减少样品载量E、早出的峰变形原因解决方法1、样品溶剂选择不恰当a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解决方法1、柱外效应a、调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）b、使用小体积的流通池G、K’增加时，脱尾更严重原因解决方法1、二级保留效应，反相模式a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入盐或缓冲剂（或离子化样品）d、更换一支柱子2、二级保留效应，正相模式a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入水（或多官能团化合物）d、试用另一种方法3、二级保留效应

7、，离子对加入三乙胺（或碱性样品）H、酸性或碱性化合物的峰拖尾原因解决方法1、缓冲不合适a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液I、额外的峰原因解决方法1、样品中有其他组份正常2、前一次进样的洗脱峰a、增加运行时间或梯度斜率b、提高流速3、空位或鬼峰a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积J、保留时间波动原因解决方法1、温控不当调好柱温2、流动相组分变化防止变化（蒸发、反应等）3、色谱柱没有平衡在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱K、保留时间不断变化原因解决方法1、流速变化重新设定

8、流速2、泵中有气泡从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相L、基线漂移原因解决方法1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通