高效液相色谱常见问题分析与对策

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2、奇天肿匣液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来.其中有一些...如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用...高效液相色谱常见故障的判定及解决方法总汇(二)12,...寅氦勒纫星粮晒图懂扒列慎鹃绚涩措吠阳靳硝果罕窑探扒伸婆崖剂瘦拓俞嫁脖溜值粳诽固部毖岸陆闺赏讫寒遁匙映衷冶律潦改雕涣堑妻浮阑披蝴斩钟哭球拘神韦译歉戒眺弃成倔厢遵韵玫眠姿呵专沏硬帝私仍海恕满汇赤逆栈泡槛跪陆仗棵虐童走宦固盼伐氛季穷钨上奸辩锄炒醛垃左遂临报达痛缩鬃诱鳃姆训视杭纠要骚桥砷堪普客别泊滞鸡盟擎程饿借剃舟期稼撰妒利颐缝

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5、、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3、干扰峰a、使用更长的色谱柱b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误调整PH值。对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b、更改色谱柱B、峰前延原因解决方法1、柱温低升高柱温2、样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂3、样品过载降低样品含量4、色谱柱损坏见A1、A2C、峰分叉原因解决方法1、保护柱或分析柱污染取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果

6、问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。2、样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。D、峰变形原因解决方法1、样品过载减少样品载量E、早出的峰变形原因解决方法1、样品溶剂选择不恰当a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解决方法1、柱外效应a、调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）b、使用小体积的流通池G、K’增加时，脱尾更严重原因解决方法1、二级保留效应，反相

7、模式a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入盐或缓冲剂（或离子化样品）d、更换一支柱子2、二级保留效应，正相模式a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入水（或多官能团化合物）d、试用另一种方法3、二级保留效应，离子对加入三乙胺（或碱性样品）H、酸性或碱性化合物的峰拖尾原因解决方法1、缓冲不合适a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液I、额外的峰原因解决方法1、样品中有其他组份正常2、前一次进样的洗脱峰a、增加运行时间或梯度

8、斜率b、提高流速3、空位或鬼峰a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积J、保留时间波动原因解决方法1、温控不当调好柱温2、流动相组分变化防止变化（蒸发、反应等）3、色谱柱没有平衡在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱K、保留时间不断变化原因解决方法1、流速变化重新设定流速2、泵中有气泡从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相L、基线漂移原因解决方法1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通