rap1b通过gsk-3ββ-catenin信号抑制高糖诱导的小管上皮细胞凋亡

《rap1b通过gsk-3ββ-catenin信号抑制高糖诱导的小管上皮细胞凋亡》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中文分类号R692．6分类号UDC610硕士学位论文校代码10533Rap1b通过GSK．3p／D．catenin信号抑制高糖诱导的小管上皮细胞凋亡RaplbinhibitHighGlucose—inducedhumanrenaltubulerepithelialceUsapoptosisthroughGlycogenSynthase】函nase3D／B—CateninSignaling作者姓名：杨玉艳学科专业：临床医学研究方向：内科学学院(系、所)：湘雅二医院指导教师：孙林教授答辩委员会主席鲫!丝中南大学二0一三年五月硕士学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行

2、的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名：学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提

3、供信息服务。硕士学位论文中文摘要摘要Raplb通过GSK．3p／p．catenin信号抑制高糖诱导的小管上皮细胞凋亡目的观察高糖刺激下。肾小管上皮细胞R印1b表达变化，初步探讨Raplb蛋白对高糖诱导的人近端肾小管细胞凋亡保护机制。方法常规培养人肾小管上皮细胞(瞰．2)，以不同浓度葡萄糖(5mM、10mM、20mM、30训Ⅵ)和高浓度葡萄糖(30mM)在不同时点刺激HK．2细胞，W-estemBlot检测Raplb—GTP表达变化。转染pcDNA3，1瓜aplb或empt)，pcDNA3．1vector质粒，以W-estemblot检测低糖及高糖环境下}Ⅱ<一2细胞GSK．3p磷酸化水平、

4、核p．catenin蛋白及凋亡蛋白caspase一3表达变化，应用RT．PCR检测抗凋基因survivin、bcl．2表达变化。进一步加入Licl或wortma姗in抑制或激活GSK一3p，以Wrestemblot检测高糖环境下胍．2细胞p—catenin蛋白及凋亡蛋白caspase一3表达变化，ImPCR检测抗凋亡基因survivin、bcl—2表达变化。结果(1)肽．2细胞Raplb—GTP的表达在30mMD．葡萄糖处理2h时表达最弱。(2)过表达的Raplb可以上调GSK一3的磷酸化水平及促进p．catenin核转录，上调抗凋亡基因survivin及Bcl一2表达，抑制凋亡蛋白激活。

5、(3)GSK—p抑制剂LiCl促进p—catenin核转录，上调抗凋亡基因sur、，ivin及Bcl一2表达，抑制凋亡蛋白激活。而GSK一3p间接抑制剂wortmannin抑制p．catenin核转录，降低抗凋亡基II硕士学位论文中文摘要因survivin及Bcl．2表达，促进凋亡蛋白的激活。结论(1)高葡萄糖抑制Ⅷ<一2细胞R印1b．GTP活性表达，且与凋亡发生相关。(2)过表达的Raplb逆转高糖刺激下瞰．2细胞凋亡蛋白的激活。(3)Raplb通过促进GSK一3p磷酸化及p—catenin细胞转录，调节下游抗凋亡基因的表达。关键词：D。葡萄糖；Raplb；肾小管上皮细胞；糖原合成激酶．

6、3p；p．catenin分类号：R692．6In硕士学位论文英文摘要RaplbinhibitHighGlucose·inducedhumanrenaltubulerepithelialceHsapoptosisthroughGlycogenAbstractSynthaseⅪnase3B／p—CateninSignalingObjectiveTodetecttheexpressionofRap1b—GTPinhumanrenalproximalepithelialcelllines(HK-2)andinVestigatetheroleofRap1binthedevelopmentofhigh

7、91ucoseinducedapoptosisinHK一2．MethodsThehumanrenaltubularepithelialcells(HK一2)linewasculturedaccordingtoroutineprotoc01．StimulateHK-2cellswithdifferentconcentrationofD—glucose(5mM、1OmM、20n心讧、30训Ⅵ)and30mMD—91ucose