klf5在肾癌细胞中的表达及临床意义

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1、目录中文摘要………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………3前言……………………………………………………………………5第一章研究对象与方法………………………………………………71.1一般资料………………………………………………………71.2实验方法………………………………………………………71.3实验仪器和主要的试剂剂……………………………………81.4实验步骤…………………………………………………………9第二章结果……………………………………………………………222.1KLF5在肾癌组织

2、和癌旁组织中免疫组化的表达情况………222.2RT-PCR检测结果………………………………………………262.3Westernblotting检测结果…………………………………27第三章讨论……………………………………………………………28第四章结论……………………………………………………………32参考文献………………………………………………………………33附录……………………………………………………………………37综述……………………………………………………………………39攻读学位期间发表论文………………………………………………49致谢……………

3、………………………………………………………50万方数据万方数据KLF5在肾癌细胞中的表达及临床意义摘要目的：通过检测锌指蛋白转录因子5（KLF5）在肾癌组织、癌旁组织中的蛋白表达，分析其在肾癌组织与癌旁组织中的表达水平，探讨KLF5蛋白表达与肾癌临床生物学特征的关系。方法：组织标本来源：收集中南大学湘雅医院2010年1月至2011年10月所收治的55例肾癌患者的临床资料、癌组织标本及10例癌旁组织（距离瘤体边缘5cm以外）标本。全部患者在手术之前均未经过任何放、化疗。1.应用免疫组织化学SP法检测55例肾癌组织，10例癌旁组织中KLF5的表达情况及

4、其各临床病理参数的关系。2.采用手术切除的肾癌新鲜组织10例，以距离瘤体边缘5cm以外的癌旁组织作为对照，运用RT-PCR检测方法，以β-Actin为内对照，检测KLF5mRNA在肾癌组织及癌旁组织中的表达。3.采用手术切除的肾癌新鲜组织10例，以距离瘤体边缘5cm以外的癌旁组织作为对照，运用Westernblotting检测方法，以β-Actin为内对照，检测KLF5在肾癌组织及癌旁组织中的表达。使用Image-proplusVersion6.0专业图像分析软件对实验结果图像行灰度值测定。结果：1.免疫组织化学染色结果显示：（1）KLF5在肾癌组

5、织和癌旁组织中均有表达。在肾癌组织中KLF5一般呈弥漫性、失极性表达,染色的程度增高,且大部分位于胞膜与胞浆中表达，然而在癌旁组织中仅在远曲小管与集合管细胞之胞膜、胞浆中存在表达,染色的强度为中等,并且呈现出顶极分布。KLF5在肾癌组织与癌旁组织中的阳性表达率具有显著差异性（P＜0.05），在肾癌组织中的表达显著高于癌旁组织。（2）KLF5的表达和患者性别、年龄、肿瘤位置、组织学类型之间无显著相关（P＞0.05），与肾癌组织学分级之间也无显著相关（P＞0.05），但与肾癌的临床分期具有显著的差异性，且呈现出正相关（P＜0.05），在有远处转移的癌组

6、织中的表达显著高于无远处转移的癌组织，其差异具有统计学意义（P1万方数据＜0.05）。2.RT-PCR检测结果显示：在肾癌组织中KLF5mRNA表达量明显高于癌旁组织：癌旁组织中KLF5mRNA的阳性表达率为30.0%（3/10），而肾癌组织中KLF5mRNA的阳性表达率为100.0%（10/10）。KLF5mRNA在癌旁组织和肾癌组织之间的阳性表达率呈上升趋势，两者之间差异性有统计学意义（P＜0.01）。3.Westernblotting检测结果显示：使用Image-proplusVersion6.0专业图像分析软件对实验结果图像行灰度值测定，计

7、算得出2X=625.38（P＜0.01），表示KLF5蛋白在肾癌组织和癌旁组织中表达差异有统计学意义。结论：1.KLF5的高表达在肾细胞癌的发生、发展过程中可能起到了促进作用。2.KLF5的高表达与肾癌的临床分期及转移具有相关性。3.检测肾癌组织中KLF5蛋白表达对于判定肾癌的转移与进展有一定临床意义。【关键字】KLF5；肾癌细胞；临床观察2万方数据ExpressionoftheKLF5proteininrenalcellcarcinomaanditssignificanceAbstractObjective:Bydetectingtheexpre

8、ssionofKLF5inrenalcancertissues、adjacenttissues,toanalyzethee