lrrc48蛋白对大鼠肝癌细胞cbrh-7919恶性表型影响的研究

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1、论文题目:坠丛g垒圣蛋自盟盔鼠赶痤细迪£量墅:2坌兰2墨丝麦型髭咆鲍班究答辩委员会主席:垡壅匝菹太堂筮盔筮数拯答辩委员会成员:湿捌医堂医自董丕塾援湿捌医堂院昌越数援温州医学院硕士学位论文目录1111111IIIrMrlllllllfY2397381英文缩略词⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯..16分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.24结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..27参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..30综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..3l参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.37学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.40温州医学院硕士学位论文缩略词BPBBSADMEMDEPCDMSOEBFBSG418HEHEPESLmLODPBSPCRI之PPCRS

3、DS.PAGE强S英文缩略词英文全称中文名称bromophenolblue溴酚蓝bovineserumalbumin牛血清白蛋白Dulbecco’SmodifiedEagle’SmediumDMEM培养基diethypyrocarbonate焦碳酸二乙酯dimethylsuifoxide二甲基亚砜Ethidiumbromide溴化乙锭fetalbovineserum。胎牛血清Geneticin新霉素Haematoxylin-eosinstain苏木精.伊红染色4啦曲droXye也y兰p譬raZinee‰Sulf4.羟乙基哌嗪乙磺酸0nlCaclct~’‘⋯litre升milliliter

4、毫升Opticaldensity吸光度phosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液polymerasechainreaction聚合酶链式反应reversetranscriptionPCR逆转录PCRSDS.polyacrylamidegel十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰electrophoresis胺凝胶电泳Tfis(hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷温州医学院硕士学位论文LRRC48蛋白对大鼠肝癌细胞CBRH.7919恶性表型影响的研究中文摘要目的:在以大鼠肝切除再生为模型研究细胞Go/G1期转换的前期工作中,发现一个新蛋白LRRC48,该蛋

5、白在大鼠肝切除后短期内表达迅速上调,持续两小时后开始下降,而在与其相对应的假手术组中,该蛋白的表达始终处于低水平。目前对LRRC48蛋白的功能尚无研究。本课题研究了LRRC48蛋白对大鼠肝癌细胞CBRH.7919侵袭、转移能力等恶性表型的影响,以期增进对LRRC48蛋白功能的深入理解,从而可能对肿瘤防治产生积极影响。方法:1.通过细胞划痕实验检测LRRC48蛋白高表达“氐表达对CBRH一7919细胞迁移能力的影响;2.通过Transwell侵袭实验检测LRRC48蛋白高表达/f氐表达对CBRH.7919细胞侵袭能力的影响;3.通过激光共聚焦鬼笔环肽标记法观察细胞微丝的分布,检测LRRC4

6、8蛋白高表达/低表达对CBRH.7919细胞骨架的影响;4.建立裸鼠皮下移植瘤模型,检测LRRC48蛋白高表达/低表达对裸鼠体重及瘤体生长的影响;5.用LRRC48蛋白高表达及对照、LRRC48蛋白低表达及对照的CBRH.7919细胞分别建立裸鼠肝癌原位模型;6.裸鼠肺组织行HE染色,检测LRRC48蛋白高表达“氐表达对肝癌的远处转移的影响。结果:1.细胞划痕实验结果显示LRRC48蛋白高表达组细胞与其对照组相比,迁移的细胞数目增多;而LRRC48蛋白低表达组细胞与其对照相组比,迁移的细胞数目减少;LRRC48蛋白高表达对照组、低表达对照组细胞与CBRH.7919细胞组相比,迁移的细胞数

7、目较一致。2.Transwel!侵袭实验结果显示LRRC48蛋白高表达组细胞与其对照组相比,侵袭的细胞数目增加;而LRRC48蛋白低表达组细胞与其对照组相比,侵袭的细胞数目减少;LRRC48蛋白高表达对照组、低表达对照组细胞与CBRH.7919温州医学院硕士学位论文组细胞相比,侵袭的细胞数较一致。3.鬼笔环肽标记法观察细胞微丝的分布显示,处理组细胞的形态较未处理组细胞有所改变,处理组细胞没有很好地铺展开,细胞边缘有回缩等贴壁不牢的现

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