ems诱变花蕾结合小孢子培养获得大白菜突变体的研究

《ems诱变花蕾结合小孢子培养获得大白菜突变体的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：密级：$634坌珏EMS诱变花单位代码：学号：10086201033l结合小孢子培养获得大白菜突变体的研究ResearchonmutantsofChinesecabbagebyEMSmutagenicbudscombiningwithmicrosporeculture学位申请人：代双艳指导教师：申书兴教授王彦华副教授学科专业：蔬菜学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二0一三年六月二日蒂田独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经

2、发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑韭盔些盘茔或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：代奴辎签字日期：加}抨6月2日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑兰垦盔些盘堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑兰垦垒些苤堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名

3、：平弋奴耗导师签名：％端谁孕I。f签字同期：州3年占月2日签字F了期：加J弓年‘月2同学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：摘要大白菜(Brassicacampestrisssp．pekinensis)是原产我国的重要蔬菜，在我国冬季的蔬菜供应中居重要地位。大白菜育种材料单一已成为育种取得突破性进展的瓶颈，创造具有丰富遗传基础的育种材料是大白菜育种工作者研究的重点之一。人工诱变可使自然突变率提高千倍以上，但人工诱变多为隐性突变，将人工诱变与小孢子培养相结合，可以迅速获得基因型纯合的突变体。本研究以10份不同基因型大白菜‘A01’、‘A06’、

4、‘23P02’、‘85一l’、‘12—2’、‘12-7’、‘A03’、‘A12’、‘A16’和‘A19’为试验材料，采用EMS为诱变剂，分别进行了种子诱变、花蕾诱变结合游离小孢子培养方法的研究，确定了不同处理方法适宜的EMS浓度和处理时间，并对种子诱变后代和花蕾诱变后小孢子植株进行了形态学鉴定及分子辅助鉴定，获得了不同类型的变异材料。主要研究结果如下：1．以7份不同基因型大白菜种子为材料，研究了不同EMS浓度和时间浸泡种子后种子的发芽率和成苗率。结果表明，在0-0．896浓度范围内，随着EMS浓度的增大，种子的发芽率和成苗率逐渐降低，初步确定大白菜种子诱变处理

5、的适宜EMS浓度为0．4％~O．6％，处理时间为4。6h。2．通过对‘A01’、‘A03’、‘A06’和‘23P02’种子诱变M：代植株进行全部形态学鉴定和部分分子学鉴定，共获得49株突变株。从170株‘A01’的M。代中筛选到6株叶片变异株，1株晚抽薹变异株；83株‘A06’的M：代植株中，叶片变异2株；76株‘23P02’的M。代植株中，7株包球方式变异株，l株大花冠变异株；285株‘A03’诱变群体中，1株花蕾变异株，9株子叶变异株，7株苗期叶片变异株，15株花器变异株。3．以‘85—1’、‘12—2’、‘12—7’、‘A03’和‘A19’为试验材料，进

6、行花蕾诱变后结合小孢子培养，设置诱变浓度和时间梯度，筛选出在叶形、叶色、花冠大小、花色、抽薹性、抗霜霉病上的基因型纯合突变体74株，突变频率15．6％。综合考虑小孢子出胚率、成苗率及有效突变体数，初步确定EMS诱变花蕾并结合小孢子培养这一技术适宜的浓度范围为0．03．0．1％、处理时间5～lOmin。4．通过对EMG花蕾诱变后小孢子培养的再生植株倍性调查，发现在获得的再生植株中二倍体植株所占的比例，随EMS浓度增大而降低，单倍体所占比例随EMS浓度增大而升高，初步证明EMS在诱变过程中对染色体的加倍起到抑制作用。5．通过对大白菜EMS种子诱变和花蕾诱变结合小孢

7、子培养两种诱变方法的比较研究，证明EMS花蕾诱变结合小孢子培养这一新方法可行，比种子诱变和小孢子诱变方法均有优势，并且获得的变异类型比较丰富，为EMS诱变技术在大白菜种质资源创新中的应用开辟了新的途径。6．通过对EMS花蕾诱变后小孢子培养的再生植株的HRM检测，筛选出花色突变体4株。并且通过与片段直接测序法相比较，证明HRM筛选EMS突变体方法可行，操作简单、成本低、高通量。关键词：大白菜；EMS；诱变；小孢子培养；Indd；HRMResearchonmutantsofChinesecabbagebyEMSmutagenicbudscombiningwithm

8、icrosporecultureAut