中草药混菌发酵生产新型生物制剂的研究

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1、分类号：S816.6单位代码：10364密级：公开级学号：S10090502525安徽农业大学学位论文中草药混菌发酵生产新型生物制剂的研究StudyonthefermentationofChineseherbalmedicinewithmixedbacteriatoproducenewbiologics研究生：戴燊指导教师：程茂基教授申请学位门类级别：农学硕士专业名称：动物营养与饲料科学研究方向：饲料与生物技术所在学院：动物科技学院答辩委员会主席2013年06月摘要本试验采取黑曲霉和植物乳杆先有氧、后厌氧发酵中草

2、药的形式，研究混菌异步发酵最佳培养基及最佳发酵工艺条件；采用高效液相色谱法（HPLC）检测中草药发酵前后成分的变化；通过爱拔益加（AA）肉鸡试验，比较对照组肉鸡的生产性能、免疫器官指数、血液指标，探讨混菌发酵中草药的价值。其研究结果如下：试验一：混菌发酵中草药最佳培养基和最佳发酵工艺的研究本试验先采用黑曲霉有氧发酵产纤维素酶、果胶酶破解植物细胞壁，再用植物乳杆菌厌氧发酵酶解。通过单因素试验和正交试验，以纤维素酶活力、果胶酶活力为指标，探索中草药混菌发酵的最佳生产工艺。试验结果表明：最佳培养基中，中草药浓度为10%

3、，葡萄糖添加量为1%，酵母膏添加量为0.2%，K2HPO4添加量为0.1%，有氧发酵温度为30℃，厌氧发酵温度为37℃，好氧厌氧发酵时间比为2：1，总发酵时间为96小时，接种量比例为2%：2%，pH为5。在此条件下，纤维素酶活达到1412.3U/mL,果胶酶活达到1287.5U/mL。中草药经混菌发酵后，粗蛋白提高了31.19%，粗脂肪提高了59.11%，P含量提高了85.71%。中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、木质素分别降解了24.21%、12.58%、17.56%。试验二：采用HPLC法检测中草药发酵前后成分的变

4、化本试验通过HPLC法建立指纹图谱，比较发酵前后中草药前后成分的变化，发现发酵后大部分物质的含量都有不同程度的提高；大多数物质峰面积由发酵前达到发酵后的1~4倍左右，其中有两处时间点的物质峰面积分别是发酵前的10.03倍和41.85倍（1.66310.03倍、8.11041.85倍）；同时复方制剂经过发酵后产生了多处新的特征吸收峰，说明中草药经发酵后，药液某些成分发生了变化，发酵后产生了新的活性物质。试验三：混菌发酵中草药替代抗生素试验对AA肉鸡的影响本试验研究了添加混菌发酵中草药与添加抗生素日粮对42日龄肉仔鸡

5、生产、免疫性能的影响。研究表明，混菌发酵组与添加抗生素相比，日增重差异显著(P<0.05)，混菌发酵组提高了11.92%。日采食量差异显著(P<0.05)，混菌发酵组提高了4.38%，料肉比差异不显著(P>0.05)；混菌发酵组和抗生素比较，脾脏指数、法氏囊指数差异不显著(P>0.05)，但有提高的趋势。在胸腺指数方面，混菌发酵组和添加抗生素组相比，差异显著（P<0.05）；在总抗氧化能力上(T-AOC)，混菌发酵组比抗生素组提高17.49%，差异显著（P<0.05）。总超氧化物歧化酶（T-SOD）比抗生素组提高

6、了3.27%（P<0.01）。丙二醛（MDA）比抗生素组降低了7.72(P<0.01)。关键词：中草药，混菌发酵，AA肉仔鸡，生产性能IAbstractThisexperimentusedtheAspergillusnigerwithaerobicfermentation,thenusedthelactobacilluswiththeanaerobicfermentationtofermentChineseherbalmedicine,exploredthebestsubstrateandthebestprodu

7、ctiontechnologyofChineseherbalmedicinewithmixedbacteria;usedthemethodofhighperformanceliquidchromatographytocomparethechangeofChinesemedicinalherbsbeforeandafter-fermentation;throughtheexperimentoffeedingtrialonbroilerofArborAcres,comparedthegrowthperformance

8、,immuneorganindexandbloodindexwithcomparation,exploredthevalueofChineseherbalmedicinewithmixedbacteria.Toaffordbasisinordertoseekthereplacementofantibiotic.Theresultsofstudyasfollows:Expe