蓖麻碱高效降解菌选育及混菌发酵条件的优化

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1、分类号：TS201．3密级：(秘密、机密、绝密)学校代码：10057研究生学号：09811004蓖麻碱高效降解菌选育及混茵发酵条件的优化BreedingofHighlyEffectiveDegradingMicroorganismsforRicinineandOptimizationofFermentationConditionsbyMixedStrains专业名称：指导教师姓名：研究生姓名：申请学位级别：论文提交同期：论文课题来源：学位授予单位：农产品加工及贮藏工程(工)王昌禄教授孔祥波工学硕士2011年12月

2、横向项目天津科技大学天津科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果内容，也不包括为获得天津科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：孙样塘日期：如f1年弓月w日知识产权和专利权保护声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师具体指导下并得到相关研究经费支持

3、下完成的，其数据和研究成果归属于导师和作者本人，知识产权单位属天津科技大学；所涉及的创造性发明的专利权及使用权完全归天津科技大学所有。本人保证毕业后，以本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名第一单位仍然为天津科技大学。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。．I·．作者签名：豕矗≯感1日期：山I>年乡月如日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子舨，同意公布论文的全部或部分内容，允许论文被查阅和借阅。本人授权

4、天津科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密II(请在方框内打“√”)，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于作者签名：导师签名：(请在方框内打“巾)。日期：JDf上年害月山日日期：切矿年≥月刎摘要蓖麻产业的不断发展为我们带来了一种新型的优质蛋白饲料资源——蓖麻饼粕，它丰富的蛋白质、氨基酸及多种矿物质元素是饲料开发的一大亮点，但其中含有的蓖麻碱及变应原毒素限制了它的应用，尤其是蓖麻碱，属于剧毒生物碱，降解处理较为困难。本文从变质的

5、蓖麻饼粕中分离筛选出一株可高效降解蓖麻碱的细菌，并从实验室现有菌株中筛选出一株脱毒效果良好的酵母菌，采用混合发酵方式处理蓖麻饼粕，降解其中的蓖麻碱毒素，经单因素试验和响应面分析优化发酵条件，构建了相应的二次多项式回归模型，获得最佳工艺参数；比较了发酵前后饼粕的营养成分变化，对供试菌株腈水解酶的活性进行了初步研究，主要结果如下。从腐败变质的蓖麻饼粕中筛选出一株高效降解蓖麻碱的细菌BPW，蓖麻碱降解率可达67．04％，经形态观察及生理生化鉴定，初步判断为节杆菌属；从实验室现有降解菌中筛选出一株假丝酵母SJM，其蓖麻碱

6、降解率为66．30％。对两株菌混合发酵处理蓖麻饼粕脱除蓖麻碱毒素进行研究，确定了最佳发酵条件。采用单因素试验及响应面分析法优化发酵条件，以蓖麻碱降解率为响应值得到发酵回归模型，最佳工艺参数为：底物料液比2：5，温度31℃，SJM与BPW菌接种比为1：l(v／v)，总接种量14．35％(v／w)，培养时间131h，在此条件下，蓖麻碱降解率可达94．19％，变应原降解率91．04％，发酵后饼粕蛋白质总量无明显变化。菌株腈水解酶活性分析表明，实验条件下使用供试菌液3mL，pH=7(BPW菌)或pH=8(SJM菌)，反应

7、20min为蓖麻碱降解活性最佳测定条件，此时细菌BPW降解率约41．59％，酵母SJM约39，88％。底物专一性试验推测，两株菌都含有酰胶酶。关键词：蓖麻碱；蓖麻饼粕；混菌发酵；降解ABSTRACTAnewtypeofhigh—qualityproteinfeedresource—castorbeanmealisbroughtaboutbvthedevelopmentofcastorindustry．Itsrichprotein，aminoacidsandmineralsaremajorbrightspotsin

8、fodderdevelopment．However，ricinineandallergenlimitsitsapplication．Especiallyricinine，whichisahighlytoxicalkaloid，causesmuchdifficultyindegradationtreatment．Inthisarticle，astrainofbacteria