p162对食管癌细胞株eca109的放射增敏作用及其对p75ntr表达的影响

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1、分类号:UDC:密级:猷虞种拨夫·硕士学位论文P162对食管癌细胞株Ecal09的放射增敏作用及其对p75NTR表达的影响EnhancementofRadiosensitivi锣andInhibitionofp75NTRExpression,.———.。.........—、———.——inEsophagealCancerStemCellEcal09byaNo—v—el—P—ep——t——i——d———e——........———.—.....——郑娇娇指导教师姓名:申请学位级别:论文定稿日期:学位授予单位:学位授予闩期:吴清明教授武汉科技大学附属天佑医院答辩委

2、员会主席:余保平教授评阅人:程斌教授刘俊教授武汉科技大学研究生学位论文创新性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立进行研究所取得的成果。除了文中已经注明引用的内容或属合作研究共同完成的工作外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:鲞鬈耸日期:塑垡车兰月Z日研究生学位论文版权使用授权声明本论文的研究成果归武汉科技大学所有,其研究内容不得以其它单位的名义发表。本人完全了解武汉科技大学有关保留、使用

3、学位论文的规定,同意学校保留并向有关部门(按照《武汉科技大学关于研究生学位论文收录工作的规定》执行)送交论文的复印件和电子版本,允许论文被查阅和借阅,同意学校将本论文的全部或部分内容编入学校认可的国家相关数据库进行检索和对外服务。论文作者签名:指导教师签名:武汉科技大学硕士学位论文第1页摘要目的:探究靶向G3BP(GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白)的全新抗癌多肽P162对人食管癌细胞株Ecal09是否具有放射增敏作用。通过分析单纯x线照射组与联合P162组中食管癌干细胞比例差异,进一步探讨P162对食管癌细胞系Eca一109的放射增敏机制,及其对食管癌干细胞

4、增殖的影响。方法:1.免疫细胞化学法检测人食管癌细胞株Ecal09中G3BP的表达情况。2.采用CCK-8法检测2.5、5、10、20、409mo儿P162对Ecal09细胞增殖抑制率的影响,倒置显微镜观察细胞形态学变化。3.取对数期生长的食管癌Ecal09,以0、2.5、5、109mol/LP162作用48小时后联合X线照射。采用集落形成实验计数各组细胞集落数,计算集落形成率、细胞存活分数,单靶多击模型拟合细胞存活曲线并得到放射生物学参数Do、Dq、SF2。以放射增敏比(SERD。)作为放射敏感性评价指标,SERDq为单纯照射组Dq与照射加药组Dq比值。4.流

5、式细胞仪检测0、2、4、6、8Gy照射剂量下的对照组及联合P162实验组中p75川R的比例变化。结果:1.免疫细胞化学检测食管癌细胞Eca.109中G3BP的表达结果:镜下观察G3BP蛋白阳性产物主要位于细胞浆,×100倍视野下随机选取计数10个视野,进行免疫细胞化学显色计分,得到分值为1.92±0.346,提示食管癌细胞Eca一109中G3BP高表达。2.P162对食管癌细胞Eca.109增殖的影响:以2.5、5、lO、20、409mo儿P162处理细胞,24小时增殖抑制率:16.19%、21.74%、28.65%、26.73%、29.05%;48小时增殖抑制

6、率:18.93%、29.37%、49.31%、56.31%、61.08%;72小时增殖抑制率:32.53%、42.27%、62.35%、68.43%、67.62%。结果提示:P162对食管癌细胞Ecal09增殖有抑制作用,随着P162浓度的增加,Eca-109细胞的增殖抑制作用呈现增加趋势,并且随着P162作用时间的延长,细胞增殖抑制率亦呈现增加趋势。3.P162对Ecal09细胞形态学影响:未经P162处理的细胞贴壁,生长良好,圆形或不规则多边形,细胞透亮,如铺路石排列。159mol/LP162处理24h后,单位面积细胞数量减少,细胞形态逐渐改变,由贴壁逐渐脱

7、落,胞体回缩变圆,体积缩小,形态不规则或呈圆形,随时间延长此类细胞增多。处理48h后细胞较多漂浮,无光泽,内部结构不清楚,胞质内较多颗粒样及空泡状结构。72h后细胞变圆呈球形,体积明显增大,内部结构消失。4.P162对Ecal09细胞的放射增敏作用:0、2.5、5、109mol/LP162作用于Ecal09细胞48小时并联合放疗后,各组细胞放射生物学参数:Do值为1.95、1.54、1.64、1.07Gv,Dq值为2.91、1.89、1.24、1.25Gy,N值为4.45、3.40、2.13、3.22,放射增敏比(SERD0)第1I页武汉科技大学硕士学位论文为1

8、.54、2.35、2.3

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1、分类号:UDC:密级:猷虞种拨夫·硕士学位论文P162对食管癌细胞株Ecal09的放射增敏作用及其对p75NTR表达的影响EnhancementofRadiosensitivi锣andInhibitionofp75NTRExpression,.———.。.........—、———.——inEsophagealCancerStemCellEcal09byaNo—v—el—P—ep——t——i——d———e——........———.—.....——郑娇娇指导教师姓名:申请学位级别:论文定稿日期:学位授予单位:学位授予闩期:吴清明教授武汉科技大学附属天佑医院答辩委

2、员会主席:余保平教授评阅人:程斌教授刘俊教授武汉科技大学研究生学位论文创新性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立进行研究所取得的成果。除了文中已经注明引用的内容或属合作研究共同完成的工作外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:鲞鬈耸日期:塑垡车兰月Z日研究生学位论文版权使用授权声明本论文的研究成果归武汉科技大学所有,其研究内容不得以其它单位的名义发表。本人完全了解武汉科技大学有关保留、使用

3、学位论文的规定,同意学校保留并向有关部门(按照《武汉科技大学关于研究生学位论文收录工作的规定》执行)送交论文的复印件和电子版本,允许论文被查阅和借阅,同意学校将本论文的全部或部分内容编入学校认可的国家相关数据库进行检索和对外服务。论文作者签名:指导教师签名:武汉科技大学硕士学位论文第1页摘要目的:探究靶向G3BP(GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白)的全新抗癌多肽P162对人食管癌细胞株Ecal09是否具有放射增敏作用。通过分析单纯x线照射组与联合P162组中食管癌干细胞比例差异,进一步探讨P162对食管癌细胞系Eca一109的放射增敏机制,及其对食管癌干细胞

4、增殖的影响。方法:1.免疫细胞化学法检测人食管癌细胞株Ecal09中G3BP的表达情况。2.采用CCK-8法检测2.5、5、10、20、409mo儿P162对Ecal09细胞增殖抑制率的影响,倒置显微镜观察细胞形态学变化。3.取对数期生长的食管癌Ecal09,以0、2.5、5、109mol/LP162作用48小时后联合X线照射。采用集落形成实验计数各组细胞集落数,计算集落形成率、细胞存活分数,单靶多击模型拟合细胞存活曲线并得到放射生物学参数Do、Dq、SF2。以放射增敏比(SERD。)作为放射敏感性评价指标,SERDq为单纯照射组Dq与照射加药组Dq比值。4.流

5、式细胞仪检测0、2、4、6、8Gy照射剂量下的对照组及联合P162实验组中p75川R的比例变化。结果:1.免疫细胞化学检测食管癌细胞Eca.109中G3BP的表达结果:镜下观察G3BP蛋白阳性产物主要位于细胞浆,×100倍视野下随机选取计数10个视野,进行免疫细胞化学显色计分,得到分值为1.92±0.346,提示食管癌细胞Eca一109中G3BP高表达。2.P162对食管癌细胞Eca.109增殖的影响:以2.5、5、lO、20、409mo儿P162处理细胞,24小时增殖抑制率:16.19%、21.74%、28.65%、26.73%、29.05%;48小时增殖抑制

6、率:18.93%、29.37%、49.31%、56.31%、61.08%;72小时增殖抑制率:32.53%、42.27%、62.35%、68.43%、67.62%。结果提示:P162对食管癌细胞Ecal09增殖有抑制作用,随着P162浓度的增加,Eca-109细胞的增殖抑制作用呈现增加趋势,并且随着P162作用时间的延长,细胞增殖抑制率亦呈现增加趋势。3.P162对Ecal09细胞形态学影响:未经P162处理的细胞贴壁,生长良好,圆形或不规则多边形,细胞透亮,如铺路石排列。159mol/LP162处理24h后,单位面积细胞数量减少,细胞形态逐渐改变,由贴壁逐渐脱

7、落,胞体回缩变圆,体积缩小,形态不规则或呈圆形,随时间延长此类细胞增多。处理48h后细胞较多漂浮,无光泽,内部结构不清楚,胞质内较多颗粒样及空泡状结构。72h后细胞变圆呈球形,体积明显增大,内部结构消失。4.P162对Ecal09细胞的放射增敏作用:0、2.5、5、109mol/LP162作用于Ecal09细胞48小时并联合放疗后,各组细胞放射生物学参数:Do值为1.95、1.54、1.64、1.07Gv,Dq值为2.91、1.89、1.24、1.25Gy,N值为4.45、3.40、2.13、3.22,放射增敏比(SERD0)第1I页武汉科技大学硕士学位论文为1

8、.54、2.35、2.3

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