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1、学校代码：10114分类号：R735.2硕士学位论文1，25-二羟维生素D3对人胃粘膜上皮细胞恶性转化过程的影响研究生：张明明指导教师：贾彬教授专业名称：外科学研究方向：普外肝胆、微创与肿瘤学位类型：专业学位所在学院：山西医科大学第二临床学院中国山西二○一三年三月分类号：R656单位代码：10114密级：公开学号：2010207341，25-二羟维生素D3对人胃粘膜上皮细胞恶性转化过程的影响研究生：张明明指导教师：贾彬教授申请学位门类级别：医学硕士专业名称：外科学研究方向：普外肝胆、微创与肿瘤所在学院：第二临床学院二○一三年三月论
2、文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1、交回学校授予的学位证书；2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生
3、的法律纠纷。论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：日期：年月日指导教师签名：日期：年月日（本声明的版权归山西医科大学
4、所有,未经许可,任何单位及任何个人不得擅自使用）山西医科大学硕士学位论文目录中文摘要1ABSTRACT3英文缩略词表6前言7材料与方法8结果12讨论15结论17参考文献18综述21致谢35个人简历36山西医科大学硕士学位论文1，25-二羟维生素D3对人胃粘膜上皮细胞恶性转化过程的影响中文摘要研究背景与目的随着社会的进步和经济的快速发展，城市化进程的加速和化境的污染，人们生活方式及饮食结构的发生了明显改变，同时疾病谱也发生了变化。尽管医学的进步，恶性肿瘤的死亡率呈现逐年下降趋势,但各类恶性肿瘤的发病率不断上升，特别是消化系统恶性肿瘤
5、，占有较大比例，如胃癌、肝癌、胰腺癌等。是威胁人类生命的重要因素之一。据统计,每四个死亡病例中就[1]有一个是死于恶性肿瘤。对于肿瘤的研究，发病机制是医学研究的一个热点。MNNG是由人工合成的亚硝基类化合物,替代自然界中的亚硝酰胺类化合物,用来研究在肿瘤形成中的作用。它与胃液中亚硝基物的诱变机制相似。GES-1细胞来源于人,虽然具有永生性,但仍保留了部分正常胃粘膜的特性,如正常的骨架系统、粘蛋白分泌功能、停泊依赖性和裸鼠中非致瘤性等。在MNNG作用下GES-1发生了一些表型改变,如染色体畸变增多、骨架微丝异常、克隆形成率增加,并[
6、2]获得软琼脂集落生成能力。研究已经证实，经MNNG诱导后大部分细胞会逐渐死亡，一周左右时间,GES-1细胞将发生如染色体数目、结构异常,基因重排，幼[3]鼠接种后可致瘤。流行病学证据表明，经常暴露于亚硝胺类饮食的环境中的人们，与胃癌的发生发展密切相关。亚硝胺类物质对人体的致癌性已成为一个全[4、5]球性健康问题。1，25-二羟维生素D3是维生素(Vit)D3经肝、肾代谢后的主要活性形式,有着重要的生物活性,其生物效应是由VitD受体(VDR)介导的。近年来随着国内外学者对1，25-二羟维生素D3的研究不断深入,发现除了维持体内钙
7、环境相对稳定外,还具有调节免疫、抑制肿瘤细胞增殖等十分广泛的作用，1，25-二羟维生素D3具有一定的防癌及抗癌活性,对乳腺癌、肺癌等具有较好的[6-7]治疗作用。本实验是通过将体外培养的人胃粘膜上皮细胞系（GES-1），经化学致癌剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（MNNG)诱导使细胞恶性转化，研究1，25-二羟维生山西医科大学硕士学位论文素D3(骨化三醇)在经MNNG恶性转化的过程中对细胞生长、凋亡及Shh、Gli1基因表达的产生的影响，以便为癌变的机制和预防提供理论依据。方法1.分为实验组、对照组和GES-1组。MNNG诱导的
8、GES-1细胞（对照组），诱导后-6-7-8-9给予不同浓度（10、10、10、10mmol/L）1，25-二羟维生素D3进行干预（实验组）。2.采取四甲基固氮唑盐（MTT）检测实验组和对照组细胞增殖并确定实验组最佳药物浓度。3.流式细胞仪（flo
