高通量低功率激光诱导hsf细胞凋亡的旁效应研究

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1、南开大学硕士学位论文高通量低功率激光诱导HSF细胞凋亡的旁效应研究姓名：张森申请学位级别：硕士专业：生物物理学指导教师：张天浩20090501摘要细胞旁效应，即受刺激细胞临近的旁细胞表现出与受刺激细胞相同的生物学效应。我们以低功率激光作为刺激因素研究旁细胞凋亡的旁效应。目的：探讨低功率高通量激光刺激人皮肤成纤维细胞(HSF)时，受照射细胞是否存在大量凋亡，在受照射细胞临近的旁细胞是否存在凋亡，以及产生这种效应的机制。材料与方法：取高糖型DMEM培养的人皮肤成纤维细胞，制成一定细胞浓度的单细胞悬液，接种于35ram培

2、养皿，培养板底部用刀片刻上细痕以标记观察视野，细胞放培养箱里培养至贴壁后，于激光下照射4小时、6小时、8小时及照射8小时后于C02培养箱中培养12小时，观察细胞形态学变化。结果：受照射区域，细胞表现出少量的凋亡，大部分细胞未因为激光照射出现形态学变化，受照射细胞临近的旁细胞结构完整，未出现细胞凋亡。结论：与其他成纤维细胞相比，比如瘢痕成纤维细胞，激光照射时候，人皮肤成纤维细胞表现出更大的耐受性，由于成纤维细胞作为真皮层的主要细胞，长期暴露与光环境下，这种耐受性可能是长期自然进化的结果。关键词：旁效应，人皮肤成纤维细

3、胞，凋亡，高通量低功率激光，耐受性AbstractBystandereffectisoneofphenomenathatcells，whicharenotstimulatedbutnearthestimulatedcellsdemostratesthesamebiologicaleffectasstimulatedcells．Inourexperiments，Lowpowerlasersareusedtoinvestigatethebystandereffectofapoptosis．Objective：inves

4、tigatingwhethertheirradiatedcellswouldbedeadwhenthehumanskinfabroblastsareirradiatedbylow—powerhigh—fluencelasers，andwhetherthebystandercellsnearbywouldbedead，andwhatthemechanismofthephenomenais．Materialandmethod：Humanskinfabroblasts(HSF)areincubatedi11lligh-g

5、lucoseDMEM．，andthenaremadeintoasingle—cellsuspension．111ecellsaleseededon35-111111cell-dish．Thedishwasmarkedbyaknifepointattheoutsideofbottomtolocatethepositonofirradiationandthepositonofirradiatedcellsandunirradiatedcells．Later，thedishisputintoincubatoruntilt

6、hecellsareanchored．111ecellsareirradiatedbylasersfor4hous，6hoursor8hours，orincubatedfor12hoursafter8hours’irradition，andthentheirradiatedcellsandbystandercellsareshotfromac砒qlerabuiltinmicroscope．Result：asmallamountofcellswhichareirradiatedshowapoptosis，mostof

7、themdemostratedgoodshape；bystandercellsarenotaffectedbyirradiationandingoodshape，anddonotshowphenomenaofapoptosis．Conclusion：comparetootherfabroblastsuchasfabroblastsderivedfromSCar，humanskinfabroblastshowmoretolerancetolightirradiation．Ashumanskinfabroblastar

8、eofteninanlightenvironment，itispossiblethatthephenomenaiscoursedbylong．termsevolution．Keywords：bystandereffect，humanskinfabroblast，apoptosis，11igh—fluence-lowerpowerlaser，ROSⅡ南开大学学