gdf-9转基因小鼠模型的建立

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1、分类号Q窆§兰UDC硕士学位论文GDF．9转基因小鼠模型的建立李云芳论文答辩日期2Q曼3生鱼旦曼旦学位授予日期答辩委员会主席虚壶逸塾攫广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均己在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，

2、即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。√口不保密。(请在以上相应方框内打“√")论文作者签名：指导教师签名：作者联系电话：日期．弘，；·i～、7日期矽『；’占．哆06电子邮箱：yunfan9051@163．tom砖南眦云玲您李毪GDF．9转基因小鼠模型的建立摘要目的：通过建立转GDF一9基因的小鼠模型进一步揭示GDF．9基因的功能。方法：构建含AseI、AnII和st

3、uI三个酶酶切位点的plRES2．GDF9．EGFP的转基因载体，然后通过原核注射法导入受精卵内，获得转基因胚胎。采用手术移植法将获得的转基因胚胎移植到ICR假孕母鼠输卵管内，获得转基因小鼠。应用PCR和Southernblot对获得的FO代小鼠进行外源基因整合情况鉴定，并将转基因阳性小鼠与阴性小鼠交配繁育后代。试验结果：质粒注射浓度的比较试验结果显示，空白注射组的胚胎存活率与O．5ng／“L、lng／laL和2ng／gL这三个组的差异不显著，显著高于4ng／gL注射组(P<0．05)。DNA注射组中O．5I哕止、1ng／肛L和2ng／gL这三个浓度组间的分裂率和囊胚率差

4、异不显著，但均显著低于空白注射组(P

5、。其余92只仔鼠经PCR检测有4只为转基因阳性小鼠，部分小鼠进行Southernblotting技术检测，结果有1只有特异性的杂交信号出现。对founder小鼠进行了扩繁，产生了F1代3窝，共生仔37只，转基因小鼠的窝产仔数平均为12．3只，产仔数较野生型有所提高，但不明显。结论：本研究建立的转GDF．9基因小鼠模型结果表明，GDF．9基因的过表达可能对动物繁殖性能有一定影响。关键词：GDF．9原核注射转基因小鼠IlESTABLISHMENTOFTHEGDF．9TRANSGENICMICEMoDELABSTRACTPurpose：EstablishtheGDF一9tran

6、sgenicmicemodeltofurtherresearchthefunctionofGDF一9gene．Methods：TheplRES2一GDF9一EGFPvectorwithAseI，AftIIandStuIthreeenzymesenzymelociwascontracted．plRES2一GDF9一EGFPDNAvectorwereinjectedintofertilizedeggsbymeansofpronucleusmicroinjection(PI)toobtaintransgenicembryo．Thenthetransgenicembryoswer

7、etransplantedintooviductofthepseudopregnantICRfemalemicetoobtaintransgenicmice．UsingPCRandSouthemblottoidentificatewhethertheforeigngenewasintegratedintotheF0offsprings，andmakingthepositivetransgenicmicematewiththenegativeonesforreproduction．Results：Theresultofconce