SPC_CRE_Kras双阳性转基因小鼠自发肺部肿瘤模型的建立.pdf

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1、2013年7月中国比较医学杂志July，2013第23卷第7期CHINESEJOUＲNALOFCOMPAＲATIVEMEDICINEVol．23No．7殝檵檵檵檵殝檵檵殝研究报告檵檵檵檵殝SPC-CＲE-Kras双阳性转基因小鼠自发肺部肿瘤模型的建立高昆，刘学丽，高珊，高凯，董伟，张旭，刘宁，徐艳峰，张连峰(中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所，卫生部人类疾病比较医学重点实验室，北京100021)【摘要】目的构建一种利用Cre重组酶体内低表达诱导K-rasG12D在小鼠肺部活化的慢性自发性肺部肿瘤模型。方法首先构建一种肺

2、脏特异性低表达Cre重组酶的SPC-CＲE转基因小鼠，利用SPC-CＲE转基因小鼠与LSLK-rasG12D转基因小鼠杂交，获得SPC-CＲE-Kras双阳性转基因小鼠。对4月龄，5月龄，7月龄，9月龄SPC-CＲE-Kras双阳性转基因小鼠肺部进行取材，固定并进行常规石蜡切片及HE染色，镜下观察小鼠肺部病理特征。使用micro-CT对7月龄，9月龄SPC-CＲE-Kras双阳性转基因小鼠肺部肿瘤结节进行检测。结果获得了SPC-CＲE-Kras双阳性转基因小鼠，该小鼠在肺组织特异性低表达Cre重组酶，并诱导K-rasG12D在肺组

3、织的表达，由K-rasG12D引起肺组织肿瘤的发生。SPC-CＲE-Kras双阳性转基因小鼠4月龄肺部出现轻度炎症反应，5月龄开始肺部可见散在腺瘤样的结节，成瘤率为100%(雌6/6，雄6/6)，随着月龄增加，小鼠肺腺瘤结节呈增大趋势，病理变化呈进展状态，9月龄时通过micro-CT可以检测到肺部少量散在孤立的肿瘤结节。结论利用肺组织特异性低表达Cre重组酶的方式，建立了一种从肺部炎症反应到肺腺瘤进展时程较长的慢性自发肺部肿瘤小鼠模型，为肺癌发生的研究提供了更长的窗口期。【关键词】Cre/Loxp重组酶系统;转基因小鼠;K-ras

4、基因;小鼠肿瘤模型【中图分类号】Ｒ-332【文献标识码】A【文章编号】1671-7856(2013)07-0011-05doi:10.3969．j．issn．1671.7856．2013.007.003TheestablishmentofSPC-CＲE-KrasdoubletransgenicspontaneouspulmonarytumormousemodelGAOKun，LIUXue-li，GAOShan，GAOKai，DONGWei，ZHANGXu，LIUNing，XUYan-feng，ZHANGLian-feng(KeyL

5、aboratoryofHumanDiseaseComparativeMedicine，MinistryofHealth;InstituteofLaboratoryAnimalScience，ChineseAcademyofMedicalSciencesPekingUnionMedicalCollege，Beijing100021，China)【Abstract】ObjectiveToestablishaspontaneouspulmonarytumormousemodelinwhichtheK-Ｒasgenewasactivate

6、dbyCre/loxprecombinantenzymesystem．MethodsSPC-CＲEtransgenicmiceweregeneratedthatlowlyexpresslung-specificCrerecombinantenzyme．TheSPC-CＲEtransgenicmicewerematedwithLSLK-rasG12DtransgenicmicetoproduceSPC-CＲE-Krasdoubletransgenicmice．The4，5，7and9month-oldSPC-CＲE-Krasdoub

7、letransgenicmiceweresacrificedandthelungtissueswereextracted，fixed，embeddedinparaffinandsliced．Hematoxylin-eosin(HE)stainingwasperformedandobservedunderlightmicroscope．Micro-CTwasusedtotestthepulmonarynodulesofSPC-CＲE-Krasdoubletransgenicmice．ＲesultsTheSPC-CＲE-Krasdou

8、bletransgenicmiceweregenerated．TheexpressionofK-rasG12DintheSPC-CＲE-KrasdoubletransgenicmicecouldbeinducedbytheCre/Loxprecom