增加β,1、β,2-肾上腺素受体表达对心衰大鼠心肌细胞收缩功能的影响

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1、徐州医学院硕士学位论文增加β<,1>、β<,2>-肾上腺素受体表达对心衰大鼠心肌细胞收缩功能的影响姓名：常爱民申请学位级别：硕士专业：神经生物学指导教师：孙红20070401徐州医学院硕J二学位论文缩略词13-AlhGFPDMEMSDoDISoTTPRlOOACPBS瞰PKADPSPMAPHF缩略词表Abbreviation英文全称beta-adrenergicreceptorsGreenfluorescentproteinDulbecco’SmodifiedEagle’smediumSprague-DawlyratsOpticaldensi

2、tyisoprenalinetime-to-peakcontractiontime-to．100％relaxationAdenylylcyclasephosphate-bufferedsalinePertussistoxincAMPdependentproteinkinaseDiastolicbloodpressureSystolicbloodpressureMeanarterialpressureHeartfailure中文全称B一肾上腺素受体绿色荧光蛋白DMEM细胞培养液SD人鼠光密度异丙肾上腺素收缩时间舒张100％时间腺茁酸环化酶磷酸盐

3、缓冲液百日咳毒索cAMP依赖的蛋白激酶舒张压收缩压平均动脉压心力衰竭徐抖1医学院坝上学位论文论文独创性声明本论文生虹＆。臣筮趟墨醚整韭盘查魍!墼麴堂鲨堕：丝垒墨!堑疆我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名：壹垦盘只期：2塑罩生6且论文使用授权声明本人完全了解徐州医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅；学校可

4、以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名；!堑垦险导师签名：蜀期；2出生白徐州医学院硕士学位论文论文审阅认定书研究生壹凰在规定的学习年限内，按照研究生培养方案的要求，完成了研究生课程的学习，成绩合格：在我的指导下完成本学位论文，经审阅，论文中的观点、数据、表述和结构为我所认同，论文撰写格式符合学校的相关规定，同意将本论文作为学位申请论文送专家评审。导师签名：23生：．日期：2鲤生6目徐州医学院硕十学位论文增加p1、P2-肾上腺素受体表达对心衰大鼠心肌细胞收缩功能的影响中文摘要

5、目的心力衰竭时，交感神经是通过儿茶酚胺作用于心肌细胞膜上的肾上腺素受体(AR)，而p-Ag在介导心脏功能中占主导地位。导致心衰的许多疾病中，心肌细胞IB-AR发生了变化，主要表现为pI-AR密度下调，而[3z-AR密度改变不明显，致使Dl／D2．AR比例改变，从而使心肌收缩反应性下降，并影响心肌储备。研究发现，在心衰和老化的心脏上，B1．AR诱导心肌细胞凋亡而[}2-AR对心肌细胞的凋亡有抑制作用，因此，本实验旨在利用转基因技术将p1．、p2一AR基因导入心衰心肌细胞，增加p1．、p2-AR表达，观察是否可改善心衰心肌细胞的收缩功能，为心衰的

6、治疗提供实验依据。方法动物随机分对照组和心衰组，用异丙肾上腺素制作大鼠心衰模型，测血液动力学。分离培养心衰和J下常成年大鼠心肌细胞，心肌细胞分为4组：正常对照组、心衰组、pl转染+心衰组、p2转染+心衰组。每组按给药不同又各自分为：正常对照组分为：空白对照组(Control，心肌细胞不做任何处理)、Bl受体选择性阻断剂CGP20712A(CGP)、p2受体选择性阻断剂IClll8551组(ICI组)；心衰组分为：心衰组(F组)、心衰+ICI组、心衰+CGP组、GFP+4l,衰组；Bl转染+心衰组分为：p1转染+心衰组、pl转染+心衰+CGP组

7、；p2转染+心衰组分为：p2转染+心衰组、B2转染十心衰+ICI组。各组均于培养24h后，作下述指标的测定：用Westernblot测pI或p2一AR蛋白表达量；不加入或分别加入ICIll8551或CGP20712A孵育1．2h后做单个心肌细胞收缩功能的测定。数据以X±S表示，徐州医学院硕：{：学位论文统计分析采用单因素方差分析(ANOVA)，成组设计的两组问均数比较采用t检验。结果1．血流动力学指标：与正常组的大鼠比较，心衰组的大鼠平均动脉压(MAP)，收缩压(sP)升高，舒张压(DP)升高，左心室内压变化速率(士dp／dt)改变，差异有统

8、计学意义俨<0．Ol或P<0．05)。2．Westernblot结果：携带人9l_AR基因的腺病毒感染心衰大鼠心肌细胞后D1．AR蛋白表达明显增高(P<0．01)；