中华绒螯蟹性腺抑制激素纯化及其部分生化特性的研究

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1、河北大学硕士学位论文中华绒螯蟹性腺抑制激素纯化及其部分生化特性的研究姓名：温秀荣申请学位级别：硕士专业：水生生物学指导教师：康现江20050601摘要本文以甲壳动物十足类中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)的眼柄视神经节为材料，通过超声波破碎并加热离心，得到眼柄激素粗提液，之后应用反相层析的方法，分离得到13个样品。通过检测血糖浓度的方法确定了高血糖素的范围，进而确定了性腺抑制激素活性鉴定的重点范围。高血糖素实验中，样品9具有高血糖的作用，且非常明显，可以确定是高血糖素或者含有高血糖素。采用异源生

2、物日本沼虾(Macrohrachiumnipponense)卵母细胞，与分离的样品共同培养以检测样品的性腺抑制活性；另外还通过同种活体注射实验检测分离样品的性腺抑制活性。结果显示其中注射样品6的实验动物卵母细胞直径最小，抑制率最高，为59．03％。进一步分离后测定其生化性质。TricineSDS．PAGE电泳显示8条蛋白带；其中14．4Ku以下的有两条；等电聚焦电泳显示样品的等电点在4．7．6．4之间。关键词：中华绒螯蟹；视神经节：性腺抑制激素；活性鉴定：生化性质AbstractThroughultrason

3、icfragmentation，heatandcentrifIlga廿on，thecrudehormonesliquidofEriocheirsinensis’opticgangliawasobtained，andalso13samplesafterthefurtherisolationbyreversedphasechromatography(ru,c)．TheactivescopeofgonadinhibitionhormoneWaSdeterminedbythedeterminationofhyperg

4、lycaemicactivity．Inthebioassayforhyperglyeemicactivity,thehyperglycemicactivityofsample9wassignificant．Thesample9wasestimatedtobeorcontainingHyperglycemichermone．TheoocyteofMacrobrachiumnipponense，whichculturedwithisolatedsamples．WaSusedasheterologousinvitr

5、obioassay．TheinvivobioassayWasadaptedhomologousbioassaybyiDjcotingtheisolatedsamples．Alltheresultssuggestedthatthesample6actedgonadinhibitingactivity．Afterfurtherisolation，thecharacteroftheactivesamplewasanalyzed．TheTricineSDS．PAGErevealed8beltsofprotein．Un

6、der14．4Ku。thereweretwobelts．Isoelectricfocusingelectrophoresis(IEFE)suggestedalsothattherewerehybridproteins．TheiselectricpointWasabout4．7—6．4．Keyword：Eriocheirsinensis；OpticGanglia；GonadInhibitingHormone；Bioassay；BiochemicalcharacteristiCS河北大学学位论文原创性声明本人郑重

7、声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得河北大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。作者签名：趁耋丞日期：垫生年—上月』日学位论文使用授权声明本人完全了解河北大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布

8、论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本学位论文属于l、保密口，在——年——月——日解密后适用本授权声明。，2、不保密日。(请在以上相应方格内打“√”)．作者签名：丝查基导师签名：虚塑丛兰日期：丛!【年—』一月』日日期：趁堑年—厶月血第1章绪论1．1研究现状甲壳动物内分泌腺包括x一器官一窦腺复合体、同心腺，Y一器官、雄性腺和大颚器等。其中x器官窦腺复合体是甲壳动物重要的神经