医学毕业论文--补肾中药对核受体共调节因子表达的影响

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1、补腎中药对核受体共调节因子表达的影响作者:张磊郑腾杨民和张志灯蔡晶□□[摘要】目的通过检测含药血清培养的人乳腺癌细胞中核受体共激活因子,和核受体共抑制因子(nuclearreceptorcorepressor,NCOR)的mRNA表达,从分子水平上探讨补肾中药对核受体共调节因子表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为3个大组,每大组再分雌雄2组,每大组分别用淫羊霍、女贞子、蒸谒水灌胃14d,制备含药血清,并用含药血清培养雌激素受体缺失的乳腺癌细胞用实时荧光定量方法检测和NCOR的mRNA表达。结果补肾阳中药淫羊麗雄性大鼠含药血清上调了的表达对NCOR没有显著影响;而补肾阴中药女贞子下调了共

2、激活因子的表达,上调了NCOR的表达。结论补肾中药淫羊霍、女贞子对核受体共调节因子的表达有调节作用。□□【关键词】核受体共激活因子;核受体共抑制因子;淫羊薑;女贞子□□[Abstract]ObjectiveToexploretheeffectofdifferenttonifyingkidneyonexpressionsofsteroidreceptormRNA.MethodsWistarratsweredividedinto3groupsandeachgroupwasdividedintomaleandfemalesubgroups.Wistarratswereintragastricad

3、ministrationwithepimedium,fructusligustrilucidianddistilledwaterfor14daystomakeandNCORmRNAweredetected.ResultsTonifyingkidneyyangChinesemedicineepimediumcouldupregulatetheexpressionofNCOR.TonifyingkidneyyinChinesemedicinefructusligustrilucidicoulddownregulatetheexpressionofTonifyingkidneyChineseme

4、dicineepimediumandfructusligustrilucidihasregulationeffectontheexpressionofsteroidreceptorcoregulator.□[Keywords】Steroidreceptorcoactivator;Nuclearreceptorrepressor;Epimedium;Fructusligustrilucidi□核受体共调节因子是调节基因表达的一类蛋白包括共激活因子和共抑制因子,它们通过在不同的条件下与核受体结合从而促进或者抑制核受体对基因转录的激活作用(Do淫羊霍和女贞子都属于补肾类中药。淫羊霍增强性腺功能、

5、调节机体免疫功能、促进骨生长、延缓衰老,是一类补肾阳、强筋骨的中药⑵。女贞子可以治疗阴虚内热、头晕、目花、耳鸣、腰膝酸软、须发早白等,有补肝肾、强腰膝、清热、明目的功能⑶。共调节因子与核受体相互作用,对人的生殖生理、生长发育以及新陈代谢都有重要的调节作用(l)o淫羊翟、女贞子有类似于激素的效应〔4〕。激素发挥作用除了需要激素受体介导外,还需要共调节因子的协助,那么,淫羊戳女贞子是否能通过影响共调节因子的表达而发挥作用呢?本实验中,我们通过检测淫羊霍和女贞子含药血清培养的雌激素受体缺失的人乳腺癌细胞核受体共激活因子和核受体共抑制因子(NCOR)的mRNA相对表达水平,进一步探讨淫羊霍和女贞子

6、药效作用的机制。□□1材料与方法□□1.1实验动物24只3月龄SPF级Wistar大鼠(合格证号:0030624),购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,雄性体重(250±10)g,雌性体重(200±10)go□□1.2试验药品女贞子、淫羊翟购自福建医药集团,Gibco公司;胎牛血清,PAA公司;Trizol,Invitrogen公司珠zAmersham公司;PCR反应液,Tiangen公司;荧光定量PCR反应试剂盒,Tiangen公司;引物,如表1,上海鼎安公司氯仿异丙醇等为实验室常用分析纯药品配制。表13对引物参数□□1.3主要仪器电泳仪Biometra公司,型号Highvohagpow

7、erpackp30;核酸蛋白分析仪Amemhambiosciences公司型号Ultrospec2100pro;台式高速冷冻离心机Hettieh公司,型号Mikro22R;凝胶成像系统Kodak公司,型号GL200;梯度PCR仪Biometry公司型号96T;显微镜Olympus公司型号CX40RF200;实时荧光定量PCR仪MJResearch公司,型号DNAEngineoption2。□1.4方法□□1.4.1大鼠给

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