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1、妊娠高血压综合征并发症胎盘细胞凋亡的研究盛霞玲(广东省惠州市惠阳区妇幼保健院妇产科516001)【中图分类号1R714【文献标识码］A【文章编号】1672-5085(2010)29-0167-02【摘要】目的观察妊娠高血压综合征(PIH)并发症患者胎盘细胞凋亡的情况。方法采用DNA缺口原位标记Tunel"s技术，测定50例PIH并发症患者和50例正常妊娠妇女胎盘不同部位细胞凋亡指数，并用电镜的超微结构改变来证实。结果PIH并发症组胎盘组织绒毛滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞的细胞凋亡指数分别为［6.36±2.90%>7.98±
2、4.01%>6.13±3.01%］明显高于对照组［3.46±2.48%>5.33±2..76%、4.18±2.35%］(t=2.123,t=2.214,t=2.301,P均<0.05),电镜显示PIH并发症患者胎盘滋养细胞与合体滋养细胞均有不同程度的异常形态变化。结论PIH并发症患者胎盘组织中细胞凋亡增多，可能在PIH并发症的发牛发展过程中有重要作用.【关键词】妊娠高血压综合征并发症细胞凋亡胎盘妊娠高血压综合征(pregnancyinducedhypertension,PIH)并发症一直是产科
3、领域的一种重要的围产期疾病。凋亡是细胞死亡的正常生理过程，可见于各种牛物体的牛理或病理过程［1］。Stephen等⑵证实了胎盘组织中存在着细胞凋亡现象，在胎盘发生、发育、老化过程中起重要作用，并介导许多病理妊娠的发生。木研究通过检测正常妊娠妇女胎盘和PIH并发症患者胎盘组织的细胞凋亡情况,探讨细胞凋亡在PIH并发症中的作用。1资料和方法1.1临床病例木文收集2006年6月~2008年6月木院住院的妊娠高血压综合征(pregnancyinducedhypertensionsyndrome,PIH)并发症50例'平均孕周(37±l)周，平均年龄
4、27.8岁。选择同期分娩的50例正常晚期妊娠妇女作为对照组，平均孕周38±3周，平均年龄28.3岁。两组患者的一般资料经统计学检验均有可比性。1.2检测方法1.2.1标本胎盘娩出后，立即从母体面选取2块大小约为2.0cm×2.0cm×2.0cm的组织(避开梗死钙化灶).生理盐水冲洗后,迅速放入40g/L的PBS甲醛溶液中固定•用于电镜检查的组织放入25g/L的戊二醛液中固定.1.2.2.细胞凋亡检测:采用Gavrieli等［3］DNA缺口原位末端标记术(TDT-mediateddUTPbiotinnickending
5、labeling,TUNEL)略修改。切片脱蜡入水'抗原修复,3%H2O2阻断内源性过氧化物活性丄10配制反应液,37°C孵育1h,磷酸缓冲液冲洗，加酶标抗体，孵育，冲洗，二氨基联苯胺显色，苏木精复染，中性树胶封片，镜下观察。光镜观察时，显微镜上下调节，以保证能观察到异染色质均匀一致的凋亡细胞核•每一-标本检查3×10个视野，约观察3×1000个细胞核。1.3结果判断细胞凋亡定位于细胞核内，棕黄色颗粒。凋亡指数(Apoptosisindexes,Al)为高倍视野(×400)卜:平均1000个细胞中的阳性细胞数，以百分率
6、表示。1.4统计学处理:所有数据均经计算机图像分析仪进行处理，采用SPSS10.0统计软件包进行。组间比较用独立样本的t检验。2结果2.1PIH并发症50例妊娠高血压综合征并发症中，胎儿窘迫15例(30.0%),胎儿宫内发育迟缓8例(16.0%),胎盘早剥17例(34.0%),早产10例(20.0%)。2.2两组胎盘细胞凋亡指数的比较PIH并发症组胎盘组织绒毛滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞的细胞凋亡指数分别为［6・36±2.90%、7.98±4.01%^6.13±3.01%］明显高于对照组［3.46&plusm
7、n;2.48%>5.33±2.76%>4.18±2.35%］(t=2.123,t=2.214,t=2.301,P均<0.05),见表lo表1两组胎盘细胞凋亡指数的比较［x±s,%］与对照组比较,bP<0.052.3凋亡细胞的电镜表现PIH并发症胎盘中均有细胞凋亡的存在（图1）.在滋养细胞、间质细胞、内皮细胞可见到凋亡细胞核,口两组凋亡细胞多见于合体滋养层细胞中•电镜下可见到PIH并发症患者胎盘滋养细胞与合体滋养细胞均有不同程度的异常形态变化，凋亡的合体滋养细胞核，其染色体在完整的核膜边缘聚集浓缩（图2
8、A）.妊高征的并发症合体滋养层凋亡细胞核被排出绒毛合胞体，进入母血循环中，核周胞
