青蒿中抗蕃茄晚疫病原菌有效成分的提取分离及抑菌机理的初探

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1、内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：查!塑鍪j羔日期：塑!生!笪：』{内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，

2、即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：勘、观挖指导教师签名：∥拗、日期：2丛生1611／摘要本文以青蒿为研究对象，蕃茄晚疫病原菌为指示菌，提取并分离青蒿抗蕃茄晚疫病原菌的有效成分，并对抑菌机理进行

3、初探，结果如下t1．青蒿抑菌物质的最佳提取条件为：乙酸乙酯为提取溶剂，1：l0的料液比，在50℃下提取llh，浸提4次。此时抑菌圈直径达到49．73mm。其最小抑菌浓度为15．63mg／mL。2．通过青蒿提取物抑菌效果的影响因素试验，可知提取物在pH为8～l0时抑菌效果最好。过高或过低的温度会降低抑菌效果。蔗糖浓度和紫外线照射对抑菌效果几乎没有影响。Na+、K+、Ca”、Mg斗会降低抑菌效果，Zn2+和Fe3+离子增大抑菌效果。3．通过定性检测：初步确定提取物的有效成分可能含有黄酮类、生物碱类或萜类成分。4．对青蒿粗提取物进行分离

4、纯化，然后进行核磁共振氢谱和碳谱，确定化合物为：(3R，5QS，6R，8aS，9R，12S，12QR)一八氢一3，6，9一三甲基一3，l2一桥氧一l2H一吡喃并(4，3-j)一1，2一苯并二塞平一10(3H)一酮。5．细胞超微结构的影响进行SEM和TEM观察，可知经过药液处理后细胞破损，大量细胞死亡。6．用电导率测定细胞膜的通透性，用电导率测定细胞膜通透性，可知当药液浓度为Omg／mL时细胞膜通透性没有变化，当药液浓度为7．8～62．5mg／mL时，随着处理时间的延长细胞膜通透性略变大，当药液浓度为125mg／mL、250mg／m

5、L的时候一开始的细胞膜通透性就达到了很高，随着处理时间的延长，细胞膜通透性变化不是很大。关键字：青蒿：蕃茄晚疫病原菌；抑菌活性；提取：分离；抑菌机理lIIIllllllllllllllllllllllllllllllllqlllll0Y2600649ExtractionandSeparationofAnti—tomatoLateBlighCompositionsFromArtemisiaeAnnuaeandStudyonItsAnti-fungalMechanismAbstractInthisthesis．theactiveing

6、redientsi11theArtemisiaeAnnuaehavebeenextractedandusedtoinhibitTomatoLateBligh。Moreover，theinhibitionmechanismoftheactiveingredientstoTomatoLateBlighhasbeenstudied．1．RefluxextractionIllethodwithunivariateandorthogoilaltestshasbeenusedtodeterminetheextractionconditions

7、：Ethylacetateisusedasthesolvent，theratioofsolidtoliquidis1：10，theactiveingredientshavebeenextractedforllhoursunder5盯℃．and4timesforextractionsshowedthebestinhibitio11activitiesfortheTomatoLateBligh．Themaximumdiameteroftheinhibitionzonehasreached5lmm．Thattheminimumconce

8、ntrationoft11eextractedArtemisiaeAnnuaesolutionis15．625mg／mL．2．1mPactfactorsteststotheArtemisiaeAnnuaesolutionhavebeenconduc