远端创伤后处理通过pi3laktgsk-3β信号通路减轻缺血再灌注脑损伤研究

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1、万方数据中图分类号R鱼!垒UDC610硕士学位论文学校代码!Q533远端创伤后处理通过P13IGAkt／GSK-3p信号通路减轻缺血再灌注脑损伤研究RemotePostconditioningofTraumaWithAbdaominalSurgicalIncisionInducesCerebroprotectionviaActivationofAkt／p-Akt／Gsk·3pPathwayinRatBrain作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：周来影临床医学麻醉学湘雅医院程智刚副教授论文答辩日期!兰!：兰答辩委员会主席中南大学二。一四年五月万方数据学位论文原创

2、性声明删本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：_[雌日期：业年工月止日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅

3、；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：【丛丝L、日期：洫业年土月堕日日万方数据中文摘要远端创伤后处理通过P13K／Akt／GSK．3B信号通路减轻缺血再灌注脑损伤研究摘要目的本实验应用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，研究远端创伤后处理(Remotepostconditioningoftrauma，RPoCT)对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响，探讨RPoCT的脑保护作用是否与P13K／Akt／GSK．3B信号通路相关。方法60只健康雄性SD大鼠，体重220～2809，随机分为

4、4组(n-15)：假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I瓜组)、3h远端创伤后处理组(3hRPoCT组)和6h远端创伤后处理组(6hI心oCT组)。OSham组：大鼠仅分离颈部血管，不进行大脑中动脉梗阻，除不插入栓线外，其他手术操作步骤同I／R组。②I瓜组：参照Longa制作MCAO模型方法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。阻断大鼠右侧大脑中动脉90rain后施再灌注。(查)3hRPoCT组：建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型方法同I／R组，在大脑中动脉再灌注后3h行于剑突下3cm处行腹部纵向切口，全长约2cm，逐层切开至脏层腹膜，切开后立即使用3-0慕丝线逐层缝合伤口并消毒。④6l

5、lI心oCT组：除RPoCT在大脑中动脉再灌注后6h施加外，其他手术操作步骤同31"lRPoCT组。I／R组、3hI冲oCT组和6hRPoCT组于大脑中动脉再灌注恢复后观察24h。四组大鼠于手术完成后3h、24h分别对各组大鼠用改良的神经功能缺损评分法(modifiedNeurologicalSeverityScore，mNSS)进行评分。评分后处死大鼠取脑，用TTC染色法测定脑梗死容积；HE染色法观察脑组织形态；Nissl染色法计数存活神经细胞；免疫组化和Westemblot法观察及测定缺血测海马区p-Akt、GSK．3B及p-GSK一313(ser9)表达。结果①TTC染色：

6、Sham组未见脑梗死；与I／R组比较，3hRPoCT组脑梗死容积虽有减小趋势但无显著差异(P>0．05)；6hRPoCT组脑梗死容积显著减小(尸<0．05)。②HE染色：Sham组缺血测海马CAl区神经细胞形态正常，排列整齐；I／R组和RPoCT组脑缺血测海马CAl区均出现细胞坏死，神经细胞数目减少，间隙增宽，体积减小，核固缩，染色质浓缩、边聚，组织疏松。但RPoCT组较I／R组脑缺血海马CAl区细胞层次更清晰，数目多且细胞形态较完整，间质水肿减II万方数据轻。@Nissl染色：6hRPoCT组缺血测海马区尼氏体染色平均光密度值较UR组显著增211(P<0．05)；3hRPoCT

7、组缺血测海马区尼氏染色平均光密度值较I／R有增高趋势，差异不显著胗0．0s)。④免疫组化结果：两处理组p-Akt对比I／R组均有增高趋势，但差异无统计学意义(P>0．05)；同时两处理组GSK．3B水平也均高于I／R组，但是3hRPoCT组与I／R组比较差异不显著胗O．05)，6hRPoCT组则比I／R组显著增高(P<0．05)。OWestemBlot结果：两个RPoCT组P．Akt对比I／R组均显著增高(尸<0．05)；两个RPoCT组GSK．3B水平与I／R组相比均显著增高(